梅毒是一种经典的性传播疾病，近年来发病率有抬头趋势。由于其具有传染性且危害性大，因此对梅毒的早期诊断和及时治疗已成为当前重要问题，这对控制其蔓延尤其至关重要。实验室检测梅毒抗体阳性是诊断梅毒的重要依据之一。梅毒螺旋体侵入机体可产生两种抗体：非特异性抗体与特异性抗体。目前用于梅毒血清学的检验方法较多，主要包括非梅毒螺旋体血清试验和梅毒螺旋体血清试验。非梅毒螺旋体血清试验的抗原分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混悬液，用来检测抗心磷脂抗体。由于这些试验具有相同的标准化抗原，所以敏感性相似。常用的有3种：性病研究实验室试验（VDRL）、不加热血清反应素试验（USR）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）。可用作临床筛选，并可作定量，用于疗效观察。梅毒螺旋体血清试验包括荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、梅毒螺旋体制动试验（TPI）、梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）等。这类试验特异性高，主要用于确认试验。以上不同的检测方法都有其特殊的临床诊断价值，实验室如何更合理地选用检测方法，避免错诊、误诊、漏诊而产生医患纠纷等问题是非常必要的。为此，笔者利用RPR、TP-ELISA、TPHA，检测分析了2005年-2006年期间206份梅毒检测呈阳性的血清样本及100份正常对照血清，以探讨3种方法对梅毒辅助诊断价值。现报告如下：
材料和方法
1.材料
根据梅毒诊断标准确定一期梅毒血清样本48份，二期梅毒血清样本65份，三期梅毒血清样本43份，临床治愈后梅毒复查血清样本40份。其他经临床确定为类风湿性关节炎血清样本3份、SLE患者血清样本2份、妊娠血清样本5份。健康体检者血清样本100份。
2.试剂和仪器
RPR、TP-ELISA选用国产试剂盒，国家批批检定均为合格，TPHA为英国OMEGA公司提供。TP-ELISA使用仪器：瑞士生产的STAR全自动加样仪和FAME全自动酶免分析仪。RPR使用仪器：江苏省姜堰市天力医疗器械TL-2000A型梅毒自动旋转仪。
3.方法
按照RPR、TP-ELISA和TPHA相应的检测方法，并严格按照试剂盒的说明书操作步骤平行检测306份样本。
结果
306份血清样本分别采用RPR、TP-ELISA和TPHA法检测结果见表1。
讨论
梅毒（TP）是由梅毒螺旋体（苍白螺旋体）引起。梅毒主要通过性行为在人群中相互传播，并可以通过胎盘传染给胎儿，危及下一代；极少数患者通过其它途径传染，如接吻、哺乳、接触梅毒患者的日常用品而感染。梅毒病程分为三期，一期梅毒（初期梅毒）侵犯生殖器和皮肤黏膜，最后形成下疳。二期梅毒全身皮肤黏膜出现梅毒疹，周身淋巴肿大，有时侵犯骨、关节、眼和神经系统。三期梅毒（晚期梅毒）晚期侵犯全身各器官，并表现多种多样的症状和体征，病变几乎能累及全身各个脏器。机体感染梅毒螺旋体后可产生非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体（TP-Ab）。机体感染梅毒螺旋体后，感染后病程的不同机体产生的抗体也不同。一期梅毒抗体主要是IgM型，二期梅毒抗体有IgM、IgG型，三期梅毒抗体主要是IgG型。由于梅毒患者在不同分期梅毒抗体出现早晚有差异，故临床应同时检测梅毒非特异性抗体与特异性抗体，以防止梅毒患者的漏诊。
实验室中梅毒血清学检查包括非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验。前者常用于临床筛选及判定治疗的效果；后者则主要是确认试验，但是它不能判定治疗效果，因为一旦患有梅毒，即便经过正规抗梅毒治疗，仍可检出其特异性抗体，甚至可终生检出阳性。实验室选用了三种不同检测方法诊断梅毒：1. RPR检测梅毒非特异性抗体，用于过筛实验及疗效观察。2. TP-ELISA检测梅毒特异性抗体。3. TPHA用于梅毒的确认实验。RPR试验检查的是人体内的反应素。目前对反应素的来源尚有争议。多数人认为它是人体感染梅毒螺旋体后组织受到破坏裂解出来的一种类脂成分，这种成分与梅毒螺旋体的蛋白质结合，成为抗原，刺激机体产生抗类脂质抗体即反应素。梅毒螺旋体破坏组织可使机体产生反应素，而其他破坏机体的过程也可产生反应素，所以梅毒患者RPR试验阳性，但RPR阳性者并不一定感染梅毒螺旋体。人体某些生理状态，如怀孕时，RPR可以出现假阳性；患有急性传染病，如风疹、水痘、病毒性肝炎、上呼吸道感染、肺结核、肺炎、亚急性细菌性心内膜炎等疾病时，RPR也可以呈假阳性；许多慢性病，如类风湿性关节炎、SLE、风湿性心脏病、肝硬化、干燥综合征、慢性肾炎和海洛因成瘾等，RPR同样可以呈假阳性。因此，不能单独根据RPR阳性诊断梅毒，而应对患者进行全面检查，并密切随访。
目前已知，梅毒血清学检测，一般在下疳出现的最初几天内，RPR试验会是阴性，这主要是血清内抗体的量还不够多。感染时间不长的一期梅毒患者，体内还未来得及产生这类抗体，血清学检查则可能为阴性。硬下疳出现l－2周后，RPR试验才转为阳性。RPR试验与TPHA试验相比，前者阴转阳的时间约晚1周左右。当RPR有反应者应加做TPHA，才能确定是否感染梅毒。感染梅毒经治疗后RPR可能转变为阴性，但TPHA仍会维持阳性。梅毒晚期时会有皮肤黏膜、骨、眼等梅毒、心血管梅毒、神经梅毒等，但RPR阴性且无传染性[1]，故临床对多器官表现也需注意，及时进行梅毒确证实验。TP-ELISA是利用梅毒螺旋体基因工程混合抗原包被在微孔滴定板上，检测血清中的梅毒特异性抗体，是诊断梅毒螺旋体感染的依据之一。早期的ELISA试验采用间接法测定相应的特异抗体。近些年来，随着分子生物学技术的发展，以及对梅毒螺旋体表面脂蛋白抗原的核苷酸序列的了解，采用基因工程的方法，在体外表达得到了梅毒螺旋体的相应特异基因工程抗原，这种抗原较之从整个梅毒螺旋体经超声波裂解所得抗原要纯得多，大大提高了测定的特异性，并且ELISA的测定敏感性亦高于TPHA等方法。此外，ELISA还具有简单、快速和高通量的优点，应是梅毒血清学诊断试验的首选方法。[2]但其检测的是梅毒IgM和IgG的混合抗体，梅毒IgG抗体治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率，甚至终身阳性，因此，TP-ELISA阳性只能说明正处于感染期或曾经感染过，不能判断梅毒疾病活动与否，所以不能作为疗效监测手段 [3] 。
本文选用306份样本，其中100份为正常对照；206份阳性结果样本中，一期梅毒48例，RPR阳性率87.5%，TP-ELISA阳性率95.8%，TPHA阳性率95.8%；二期梅毒65例，RPR阳性率98.5%，TP-ELISA阳性率100%， TPHA阳性率100%；三期梅毒43例，RPR阳性率4.65%，TPHA阳性率100%，TP-ELISA阳性率100%；临床治愈复查40例，RPR阳性率5%，TP-ELISA阳性率100%，TPHA阳性率100%；另外10例为其他疾病所致RPR试剂假阳性。通过实验数据和结果证实：如RPR（-）TP-ELISA（-）TPHA（-）可排除梅毒或初期感染潜伏期；RPR（+） TP-ELISA（-）TPHA（-）为假阳性或初期感染；RPR（+）TP-ELISA（+）TPHA（+）为梅毒感染；RPR（-）TP-ELISA（+）TPHA（+）为晚期梅毒或梅毒既往感染。
因此，临床应该同时检测非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体（TP-Ab）来确诊梅毒。梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，但并非唯一依据，医生应在掌握了患者的个人生活史及体查的基础上，综合分析梅毒血清学检测结果，排除假阳性、假阴性情况，才能做出正确的诊断。通过本实验统计数据及结果表明，实验室合理地选用3种不同检测方法进行梅毒检测，将减少漏诊、误诊，为临床梅毒分期的确诊提供全面的参考依据，并且对判定梅毒的发展和痊愈、判断药物的疗效都有十分重要的意义。
参考文献
[1] 国娟、倪蓝. 748例梅毒患者血清学试验结果分析.中华现代临床医学杂志,2004.10B.
[2] 李金明编著.临床酶免疫测定技术.人民军医出版社，2005.
[3] 宋继权,盛晚香,冯谊,等.ELISA在梅毒血清学诊断中的应用.中国皮肤性病学杂志,2000,14:258-259.
