参考范围的确定方法
     广州流花桥医院检验科 林龙顺

1980年美国医学检验杂志(AmJMedTechnol)发表了一篇文章,题为“参考值(正常范围)”
:对实验室工作者的挑战。文章一开头就提出，没有适当的参考资料，要解释实验室数
据是不可能的。参考资料主要来自实验室，应该受到象对待个别病人结果一样的仔细
研究。说明参考资料的重要性及存在的问题。确定参考范围是医学科研和卫生工作的
重要课题，是医学试验评价的重要内容之一，也是检验工作者需要掌握和解决的问题。
参考范围有个体参考范围与群体参考范围两种，个体参考范围代表生物个体内变异，
而群体参考范围反映生物个体间变异。群体参考范围可以来源于文献报告，但采用文
献报告要慎重，仪器厂商与商品试剂盒提供的参考范围更不可轻易引用。一般来说，
引进一种新方法，应该首先进行小样本量的参考值调查，如果结果与文献或厂家提供
的数据相一致，就可以不再调查，否则应做进一步的调查，确定本实验室的参考范围。
下面就确定参考范围的做法和要求、常用统计方法、正态性检验及值得注意的几个问
题作一简单介绍。
一、确定参考范围的通常做法和要求
确定参考范围通常的做法是:选定足够数量的“健康”人(参考个体)作为调查的对象，
根据实际测定条件进行统一而准确的测定,然后进行统计学处理。在调查中应尽可能注
意下列内容:
1、参考人群的特点及其选择:性别、年龄、职业、身高、体重、习惯、遗传、种族与
地理位置，调查人数及调查对象的征集方法，从集体中排除或包括 的指标。
2、取标本时的环境与生理条件:紧张、运动、姿势、饮食(包括酒与饮料)、空腹时间、
吸烟、住院或非住院、内分泌及生殖状况(月经、妊娠、口服 避孕药)及药物。
3、标本的收集与贮存:动脉血、毛细管血或静脉血，有无用止血带，收集时间、抗凝
剂、抽血与分离血浆(清)的间隔时间，标本运输、分析前贮存的温度及时间，冰冻、
融化、溶血。尿的一部分或24小时总量、防腐剂。
4、所用分析方法的可靠性:准确度、精密度，质量控制情况等。
5、统计方法:如数据的分布形式，局外值排除、参考范围划定的方法。
二、常用统计方法 常用统计方法有正态分布法和百分位数法。
1、正态分布法:正态分布法就是利用正态分布原理，以均数和标准差来计算参考值限
度，根据下式确定上下限:

                         X±US

式中X为均值，S为标准差，U为常数，由值表查得或查t界值表(自由度ν=∞时的t值。
即为U值)。如取中间分布的95%可信限，U =1.960。单侧95%，U=1.645。
经正态性检验之后(见后)如属近似正态分布或对数正态分布的资料就可以用正态分布
法推算参考范围。同时还要考虑:1)是否按性别、年龄、职业等因素分组确定参考值。
如果组间差别明显且有实际意义则分别确定。2)取单侧还是双侧。如果过高、过低
都有病理意义，要确定下限和上限，这叫双侧；如果过高有病理意义，过低无病理
意义，要确定上限，反之要确定下限，这叫单侧。3)选择适当的百分界限，使所确定
的参考范围包括绝大多数“健康”人的 观察值，最常用的是95%。
用正态分布法估计参考范围所得结果稳定，受两端数据影响较小，特别是在数据精确，
样本含量不太多，要求较高时，宜采用。缺点是只适用于正态分布的资料，计算也较
繁。
2、百分位数法:将n个观察值由小到大依次排列编上秩次:X1≤X2≤X3≤....≤Xn，X1
为最小值,Xn为最大值。把这n个秩次分为100等分，与r%秩次相对应的数称为第r百分
位数，以符号Pr表示。例如在一组从小到大排列的数中，有10%的数等于或小于某个
数，其余的90%都比这个数大，那么这个数就叫做第10百分位数，记为P10。用百分
位数法确定r%参考范围就是求一组参考人群观察值的第r百分位数.可用直接法或列频
数分布表求百分位数。
采用百分位数法确定参考范围时，如同正态分布法，要考虑是否按性别、年龄、职业
等分组，取单侧还是双侧，并根据具体情况选择百分界限。如果要确定中间95%范围，
即分别除外2.5%最小值和2.5%最大值，这时应求P2.5和P97.5。如果低值无病理意义则
求P95；如果高值无病理意义则求P5。百分位数法优点:适用范围较广，可用于各种分
布的资料，计算简便。缺点:受两端数据影响大，样本含量较小时结果不稳定。有人认
为用百分位数法确定参考范围时样本含量应在120例以上，而在100例左右，一般不取
98%或99%位 数，双侧95%位数也要慎用。
三、正态性检验
正态分布有两个重要特征，一是对称性，二是正态峰。分布不对称就是偏态，包括正
偏态和负偏态；在峰态上，正态分布是正态峰，非正态分布有尖峭峰或平阔峰。资料
的对称性从频数分布表或直方图可直观地看出，但是否是正态峰一般难于判定，必须
进行正态性检验。正态性检验的方法很多，常用的有正态概率纸法、D检验法和矩法
或称动差 法等。
四 值得注意的几个问题
1、对参考值调查缺乏足够的重视，未经本室调查验证就套用别人资料。
2、调查对象不够严格，人数往往偏少。
3、未经正态性检验就用正态分布法来估计参考范围。
以往进行参考值调查手工测定工作量大，数据处理繁琐，特别是进行正态性检验。
这些给这项工作的开展带来客观困难。随着分析测定的自动化和微机专用软件的开发，
这方面的工作将变得轻而易举。而选择对象、标本采集、处理、分析测定条件便成为
工作中突出的问题。