LCR技术于1993年被用于检测Ct的感染。LCR技术要求有两对引物及DNA聚合酶和热稳定DNA连接酶参与反应。LCR技术的优点：①敏感性及特异性均高于其他方法；②适用于女性宫颈拭子、男性尿道拭子、晨尿等标本，LCR技术均可检测出Ct DNA，尤其可从尿标本中检测出衣原体[14]，这一非侵袭无损伤性的诊断方法使得对无症状人群进行普查成为可能，且易于接受，这对于女性尤为重要，因为Ct不仅出现在NGU患者的尿中，对子宫颈感染及其由宫颈感染的分泌物继发引起的阴道感染，Ct同样会在尿中出现；③LCR技术检测时间更短；④LCR技术亦存在一定的标本抑制，但其抑制率比PCR技术显著降低。
由于Ct感染在NGU诊断与治疗中占有重要地位，所以近年来Ct的实验室诊断研究一直是快速发展的领域，新的检测方法层出不穷，对各种方法的评价也是许多学者关注的焦点。尽管人们一直把培养法作为诊断Ct感染的金标准，但即使是在有经验的实验室，细胞培养敏感性只有40％～85％，这降低了它在检测低流行人群中Ct感染的使用价值。LCR技术具有高度敏感性和特异性，适合各种发病率人群的检测，尤其适用于女性尿标本的检测，所以LCR技术有望成为新的金标准[15]。
4.2 支原体感染的实验室诊断
4.2.1 Uu的检测 Uu 的检测方法主要有：①培养法原理是Uu能分解尿素产氨，使含酚红指示剂的Uu液体培养液pH值上升，颜色由黄色变为红色。再将液体培养物转种到Uu固体培养基上，能生长成具特征性油煎蛋样集落。接种标本后，经孵育，若培养基发生由黄变红的颜色变化，透明无混浊（有别于某些细菌及真菌生长）则可初步判断为有Uu生长。大多数Uu在培养24h内可获得阳性结果。如果培养基发生颜色变化，但液体又有混浊，可用0.45μm滤膜过滤后，作再接种观察。阴性结果最好观察3d以上。②代谢抑制试验 根据特异性抗体能阻止支原体的生长和代谢这一特性，可用患者血清进行代谢抑制试验。在加有抗血清的培养液中，支原体的代谢受到抑制，从而阻止了培养液的颜色改变。代谢抑制试验也可用于检测感染支原体患者血清抗体的滴度。③间接血凝试验 用经鞣酸处理的红细胞作载体，将抗原吸附在其表面，使红细胞致敏，待与相应的血清抗体相遇时，可出现肉眼可见的凝集现象。④生长抑制试验 原理同②。⑤分子生物学方法 主要包括DNA探针法和PCR方法。Uu引物的选择是PCR检测技术中的关键，一般以Uu的16sRNA、脲酶基因、Mb抗原基因为靶基因[16]。结合PCR技术，将有利于提高Uu检测的敏感性和特异性。
4.2.2 Mg的检测 Mg是Tully于1981年首次从2例NGU患者的分泌物中分离到的支原体[17]。人类基因组计划（HGP）实施以来，Mg作为模式生物，人们已经测得其全序列，其基因组在支原体中最小（580 kb）。
Mg能发酵葡萄糖和其他碳水化合物，使培养液pH值下降呈酸性，但即使降至6.0以下，Mg仍可存活。Mg不能分解精氨酸及尿素。它对营养要求复杂，须在特殊的SP24培养液中才能生长，而且生长极缓慢。因此，分离培养的难度较大。而血清学诊断因其与肺炎支原体有广泛的交叉反应而受到限制，这些都给诊断Mg感染带来困难[18]。
目前，Mg的实验室诊断主要依赖于PCR技术，PCR扩增的靶基因主要为Mg的表面抗原MgPa基因和16 sRNA基因，由于MgPa基因可能会产生变异，而降低检出率，而16sRNA则较稳定，所以用后者能够提高检测的敏感性和特异性[19，20]。最近，Yoshida等[21]建立了以Mg的16 sRNA基因为靶基因的荧光定量PCR方法，应用该方法检测了130例淋菌性尿道炎（GU）患者、84例Ct感染的NGU患者和86例NCNGU患者，检测标本为男性晨起首次尿，结果表明，Mg数量NGU患者显著高于GU患者及无症状者，NCNGU患者显著高于无症状者。
4.2.3 人型（Mh）支原体的检测 Mh具有精氨酸脱氢酶，能水解精氨酸产氨，使含酚红指示剂的Mh培养液pH值上升，呈碱性，颜色由橙黄色变为红色。Mh和Uu一样，不发酵葡萄糖，这与Mg有区别。将液体培养物转种到固体培养基上，能生长成具有特征性的油煎蛋样集落。培养基中不加尿素，需加入精氨酸，其他营养成分与Uu相同。Mh的其它实验诊断方法与Uu同。
感染泌尿生殖道的其他支原体还有穿通支原体（Mpe）、梨支原体（Mpi）、肺炎支原体（Mpn）[22]等。王荷英等[23]用培养法和PCR法对72例NGU/粘液脓性宫颈炎（MPC）患者的生殖道（宫颈）及咽部分泌物作了6种支原体的检测，结果生殖道中检出阳性率分别为Mg 23.6％、Mpe 12.5％、Mpi 2.8％、发酵支原体0、Uu 26.4 ％和Mh 8.5％；在咽部检出阳性率分别为Mg 24 6％、Mpe 14.5％、Mpi 0、发酵支原体0、Uu 2.9％和Mh 2.9％；在生殖道和咽部同时检出又属同种支原体者有10例。结果表明，在NGU/MPC患者中，常见Mg、Uu 感染，支原体新种Mpe的检出值得重视。患者生殖道和咽部可同时检出同种支原体，提示Mg、Mpe 不仅可通过性交传播，也可能通过口交传播。发酵支原体可能与NGU无关。
