福建省立医院检验科(350001) 蔡鹏威 李乐 吴长生 王颖 福建医药杂志 2002年第24卷第2期
摘 要 目的 探讨慢性支气管炎(下称慢支)患者所伴随的细胞免疫功能变化，特别是CD95的百分率变化。方法 流式细胞术检测40例慢支患者和20例健康老人外周血T淋巴细胞亚群及CD95的百分率。结果 慢支组与健康组比较，CD3、CD4明显降低，CD8升高，同时发现慢支组的CD3＋、CD4＋细胞CD95含量较健康组明显升高，CD8＋细胞CD95含量较健康组略有升高。结论 CD4＋细胞通过表达CD95杀伤自己，在免疫反应的调节中表现为主动凋亡，慢支组CD8＋细胞百分率明显增高是慢支组患者外周血淋巴细胞CD95高表达的原因。关键词 慢支 流式细胞术 CD95
为探讨慢性支气管炎(慢支)患者所伴随的细胞免疫功能变化，我们采用流式细胞术检测慢支患者CD3、CD4、CD8、CD95的百分率，结果与健康组进行比较，为临床了解慢支与细胞免疫的关系提供依据。
1 资料和方法
1.1 一般资料：(1)慢支组：1998年8月至2000年8月住院患者40例，年龄50～85岁，平均67岁；男23例，女17例。(2)健康对照组20例，年龄51～84岁，平均56岁；男11例，女9例。
1.2 试剂：双荧光标记的单克隆抗体CD3／CD95、CD4／CD95、CD8／CD95，均由法国国际免疫公司生产。
1.3 主要仪器：COULTER EPICS XL型流式细胞仪；COULTER MULTI-Q-PREP 全血标本处理器由美国COULTER公司生产。
1.4 方法
1.4.1 标本预处理：取肝素抗凝血2ml、试管2支，每管加抗凝血100μl，其中测定管加20μl单克隆抗体；阴性对照管加20μl羊抗鼠IgG，室温避光15分钟，COULTER MULTI-Q-PREP溶血处理后上机测试。
1.4.2 流式细胞仪检测：测定前用标准微球调整仪器，使变异系数在2%以内，上机后收集5000个细胞，阴性对照管调整非特异性结合细胞在1%～2％。
2 结果
见附表。
附表
两组T细胞亚群和CD95含量检测结果(x~±s％）
| n | CD3＋ | CD4＋ | CD8＋ | CD3＋CD95＋ | CD4＋CD95＋ | CD8＋CD95＋ | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 健康组 | 20 | 69.9±6.7 | 37.5±8.9 | 28.0±10.1 | 31.2±9.9 | 31.2±8.7 | 33.5±10.0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 慢支组 | 40 | 66.1±7.6* | 32.2±8.2* | 33.1±9.3* | 39.4±16.2* | 42.1±18.3* | 35.6±17.1** | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 与健康组比较，*p＜0.01，**p＜0.05 3 讨论 实验结果显示慢支组与健康组比较，CD3、CD4明显降低，CD8升高，与叶荻庆等［1］报道有些不同。同时发现慢支组的CD3＋、CD4＋细胞CD95含量较健康组明显升高，CD8＋细胞CD95含量较健康组略有升高。 细胞程序性死亡(Programmed Cell Death，PCD）或凋亡(Apoptosis）是一个具有时间性空间性的自主生理性细胞死亡过程，在引发PCD的多种因素中，有一类是通过细胞表面分子启动的，其中CD95研究进展较快。CD95为Ⅰ型跨膜糖蛋白，广泛分布于多种组织中，与之结合的配体及单克隆抗体均可诱导细胞凋亡［2］，是机体维持自身稳定的一条重要途径。 慢支患者在急性发作期和慢性迁延期多伴有炎症反应，而在炎症反应中，机体为了调整炎症反应的发展，避免继发的炎症反应及组织器官损伤，必须依赖CD95介导的细胞凋亡清除机体不再需要的细胞，对机体自身稳定产生负调节。CD4＋细胞通过表达CD95杀伤自己，在免疫反应的调节中表现为主动凋亡，这可能是慢支患者外周血淋巴细胞CD95高表达，CD3、CD4＋细胞含量明显降低的主要原因。因此，CD8＋CTL需要表达CD95作为信号传递分子才能对靶细胞发挥不依赖Ca＋溶解效应，慢支组CD8＋细胞百分率明显增高［1、3］，这可能是慢支患者外周血淋巴细胞CD95高表达的另一个因素。 参 考 文 献 1.叶荻庆，马志茹，黄天禄，等．慢性支气管炎患者免疫功能测定．陕西医学检验，1996，0.5、25；11(2)：41．2.肖东杰，汪运山．T细胞主动凋亡的研究进展．国外医学临床生物化学与检验学分册，1997，05．25；18(3)：130． 3.贺凤凤，房美娟，周琦，等．慢性阻塞性肺病患者免疫状态的研究．老年医学与保健，1996．03．25；2(1)：22． |
