常峻峰 安桂香 李巧增 甘肃省天水四○七医院检验科 741000
摘要：通过临床实验室大量反复试验研究,使瑞氏染液废旧液恢复活性,重新再利用,减少环境污染,为临床实验室带来巨大的经济效益和社会效益。
关键词：瑞氏染液废旧液；改良；重新利用
瑞氏染色液是临床细胞学分析中最基本和常用的染色剂,因其染色时间短,着色效果佳，操作方便等特点,各临床实验室都离不开它，且用量很大。然而它的配制需要大量甲醇、丙三醇、瑞氏粉等化学试剂,在配制中又需多次研磨、稀释和冲洗等多种工序,该染液又极易沾染着色,而不易脱落,因此多数实验室采用一次多配制然后蜡封,多次分装使用。现在也有成品试剂出售。
我们知道，甲醇有毒，服入10 毫升能使双目失明，30 毫升则能致死。【3】当废旧染色液排出后，必将严重污染环境，造成社会危害。
瑞氏染色液在临床实验室细胞学尤其是骨髓细胞学的研究中起到举足轻重的作用，它给血液细胞学的发展带来了光明和无限的空间。
但当各种外因使它失去活性时，却给我们增添了负担，给实验研究带来了不便，其废旧液有毒性，而且严重污染环境，给社会造成极大的危害，又因成本过高，给各实验室造成不可低估的经济损失。
因此，我们研究和探索瑞氏染色液废旧液是非常有必要和及时的，能否使它变废为宝，重新利用，是我们解决和攻克该项目的主要目的和任务。为解决多年来各实验室对废旧染色液处理的做法，我们查找大量资料进行分析，从原理、化学成分、环境温度等多方面入手研究，进行严密的化学实验，对废旧染色液进行了不同环境和温度下的多次处理，适量加入有形成分，最后经本实验室多次反复的实验、探讨。终于变废为宝，染色效果很好。现将我室经过两年多的临床研究总结如下：
1，原理和性质
1.1 一般原理
瑞氏染色液主要染料由碱性美蓝和酸性伊红两种成分组成,它们与细胞内的嗜酸性和嗜碱性的各种物质既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样，因此使细胞呈现出不同的色彩。【1 】伊红和美蓝只能溶解在有机溶剂中，而滴在水中很快形成沉淀，所以染色液必须配成甲醇等（一般都是甲醇）有机溶液，临用时加到水或缓冲液中，才能在一定的环境下离解成有色的阴离子伊红和阳离子美蓝，而与细胞中的不同物质相亲和被染色。【2 】
1.2 性质
伊红和美蓝类化合物只能溶解在有机溶剂中，如滴加到水中很快发生沉淀，容易形成沉渣。甲醇兼溶剂和起固定细胞两种作用，但它有毒，其沸点为65℃。【3】中性甘油有很强的吸湿性，能吸收空气中的水分，同时可防止甲醇挥发。【4 】
2 ，材料
①瑞氏染色液废旧液；②无水中性甘油；③瑞氏粉；④亚甲兰；⑤密闭容量瓶；⑥加热设备；⑦温度计。
3 ，方法
3.1 加瑞氏染色液废旧液960毫升于密闭容量瓶，准确称取0.75 克瑞氏粉加入，再加40毫升无水中性甘油。
3.2 加热密闭容量瓶至60-70℃，恒温10分钟。
3.3 冷却后，加0.025克亚甲兰充分混匀待用。
4，临床观察
4.1 全部采用四○七医院门诊和住院病例新鲜血涂片300 人份和骨髓片26 人份进行了染色校对。
6 ）.. . 废旧液中逐渐改变各成分对照试验，加入0.55－0.75 克瑞氏粉、无水甘油30－40 毫升，加热50℃－70℃，.. 加入亚甲兰0.01－0.25 克
4.2 操作
由技术熟练者统一按正规步骤染色，对每人份各涂三张涂片染色，用新鲜染色液、废旧液及废旧液改良液分别染色。
4.3 观察和统计：
1）.. .首先用新鲜染色液与废旧液对照染色观察结果：（以下均为1000 毫升废旧液）
7）.. . 最终确定实验数据，加入0.75 克瑞氏粉、无水甘油40 毫升，加热60－70℃，.. 加入亚甲兰0.25 克，通过反复试验，实验成功。
2）.. . 在废旧液中加入0.10 克－0.55 克瑞氏粉、无水甘油3－25 毫升
3）.. . 在废旧液中加入0.10 克－0.55 克瑞氏粉、无水甘油3 －25 毫升，微热（采用四○七医院门诊和住院病例新鲜血
涂片300 人份和骨髓片26 人份进行了染色校对研究，各实验数据可靠，供各位同行参考。）
三种对照组的涂片统一在奥林帕氏显微镜下鉴别发现，细胞染色效果特别明显，差异显著，用新鲜染色液和废旧液改良后染色的涂片特别清晰，无沉渣显现，细胞被染色后轮廓特别清楚，胞浆、胞核分明。而废旧液染色后细胞均出现淡染或模糊不清。
4）.. . 在废旧液中加入0.10 克－0.55 克瑞氏粉、无水甘油3－25 毫升，加热20℃－40℃
5 ）.. . 废旧液中逐渐改变各成分对照试验，加入0.55－0.75 克瑞氏粉、无水甘油30－40 毫升，加热50℃－70℃
从表中可看到三组别中，废旧液改良处理后与新鲜染色液完全一致，它们与废旧液染色效果有极显著差异，说明废旧液被改良处理后
达到了重新再利用的目的。
