汪小海 陆晓燕 陈载蓉 孙春红 王扬 戴黎敏 中国微循环
【摘要】目的了解血标本放置1～3 h 血气酸碱及RBC 流变性和膜Na + - K+ - ATP 酶的变化。方法随机选择ASA Ⅰ～ Ⅱ级择期全身麻醉手术患者动静脉血标本,其中,用于血气酸碱分析标本20 份,用于红细胞(RBC) 流变性分析标本30 份,用于RBC 膜Na +-K+-ATP 酶分析标本20 份,男女不拘,年龄15～60 岁。结果(1) 与放置前比较,动静脉血标本放置后其pH均逐渐显著降低,P(CO2) 均逐渐显著升高,动脉血标本P(O2) 也显著降低。(2) 放置2～3 h 后,动静脉血标本刚性指数均显著升高。(3) 动静脉血放置1～3 h 其RBC 膜Na +-K+-ATP 酶活性均显著降低。结论为避免RBC 性能的变化,在制备RBC 药物载体时,采集的动脉血或静脉血的放置时间不宜超过2 h。
【关键词】红细胞; 血气酸碱; 流变性; Na + - K+ - ATP 酶
中图分类号: R331. 1 +4 文献标识码: B
Changes of Blood Samples in Blood-gas and Erythrocyte Hemorheology and Membrane Na + - K+- ATPases After Being Placed 1～3 Hours WANG Xiao-hai , LU Xiao-yan , CHEN Zai-rong , et al. Gulou Hospital Affiliated to Medical College of Nanjing
University , Nanjing 210008 , China
【Abstract】Objective To study the changes of blood samples in blood-gas , erythrocyte hemorheology and membrane Na +-K+-ATPasses after being placed 1～3 hours. Methods Seventy blood samples were randomly taken from the ASA Ⅰ～ Ⅱ surgery patients undergoing general anesthesia (age , 15～ 60yr) for the analyses of blood-gas( n = 20) ,erythrocyte hemorheology ( n = 30) and membrane Na +-K+-ATPases ( n = 20) . Results Comparing the values before placement , the pH, rigidity index of erythrocyte and Na +-K+-ATPases of erythrocyte membrane were significantly decreased , and the P(CO2) significantly increased after arterial or venous blood samples were placed for three hours. Meanwhile , the P(O2) of artery blood samples were significantly decreased too. Conclusions In order to avoid abnormal changes of red cell function , blood samples taken for the preparation of carrier erythrocytes should not be placed beyond two hours.
【Key words】Erythrocyte ; Blood-gas ; Hemorheology; Na +-K+-ATPases
文章编号: 1007 - 8568(2003) 01 - 0024 - 03
红细胞(RBC) 药物载体是一种优化药物生物效应的新技术,它可极大地延长药物的体内半衰期[1～3 ]。药物载体制备前, 血标本的放置时间可能对红细胞的质量有影响。本研究对新鲜动静脉血标本放置1～3 h 其血气酸碱及RBC 流变性和膜Na +- K+-ATP 酶的变化进行了观测,现报道如下。
材料与方法
1 血气酸碱分析标本的采集及检测指标:随机选择ASA Ⅰ～ Ⅱ级择期手术患者20 例, 男女不拘, 年龄18～60 岁,肝肾及心功能均正常。所有病例术前30 min均肌肉注射度冷丁50 mg 和阿托品0. 5 mg。面罩纯氧吸入5 min 后予以静脉麻醉诱导, 其用药依次为异丙酚1. 0 mg/ kg、咪唑安定5～8 mg、芬太尼2～4 ug/ kg。气管插管后接麻醉机行纯氧机械通气。通气10 min后, 取动脉血标本和静脉血标本各1 ml 用于血气酸碱分析。血气酸碱分析仪器为i - STAT血液分析仪, 检测指标为pH、P(CO2) 和P(O2) 。
2 RBC 流变性分析标本的采集及分析指标:随机选择ASA Ⅰ～ Ⅱ级择期手术患者30 例分为3 组, 各10 例, 男女不拘, 年龄15～58 岁, 肝肾及心功能均正常。术前用药和麻醉方法、取血途径同血气酸碱分析患者, 血标本各为3 ml 。1～3 组血标本放置前及放置1～3 h 后测定RBC 流变性的变化。血流变测定仪器为LBY- N6A 自清洗旋转式粘度计, 分析指标为聚集指数、刚性指数、变形指数和电泳指数。
3 RBC 膜Na +- K+-ATP 酶分析标本的采集及分析指标: 随机选择ASA Ⅰ～ Ⅱ级择期手术患者20 例, 男女不拘,年龄20～60 岁,肝肾及心功能均正常。术前用药和麻醉方法、取血途径同血气酸碱分析患者,血标本各为2 ml 。Na +- K+-ATP 酶的测定方法按文献进行[4 ] , 酶活性以每mg 膜蛋白每小时释放无机磷微摩尔数(μmol Pi/mg Protein ?h - 1) 表示。
4 统计分析所有数据均采用均值±标准差表示,差异显著性分析用t 检验, P < 0. 05 为具有显著性差异。
结果
与放置前比较(表1～表3) : (1) 动静脉血标本放置后其pH逐渐显著降低, P(CO2) 逐渐显著升高, 动脉血标本P(O2) 也显著降低; (2) 放置2～3 h 后, 动静脉血标本刚性指数均显著升高; (3) 动静脉血放置1～3 h后其RBC 膜Na + - K+ - ATP 酶活性均显著降低。
表1 血标本血气酸碱的变化( x ±s)(略)
表2 血标本RBC流变性的变化( x ±s)(略)
表3 血标本RBC膜Na +-K+-ATP 酶的变化(nmol/ gHb ,x ±s)(略)
讨论
红细胞药物载体所具有的增加被包蔽药物体内稳定性及缓释性等优点, 决定了该载体可极大地延长药物体内半衰期的特性。RBC 药物载体制备前, 血标本采集后可能会被放置一定时间。我们认为, RBC 药物载体制备过程中, 红细胞的质量对红细胞药物载体的包蔽性, 以及包蔽药物体内的稳定性及缓释性等均具有重要影响作用。为此,我们对新鲜血标本放置1～3 h其血气酸碱及RBC 流变性和膜代谢的变化进行了研究。
研究显示: (1) 动静脉血标本采集放置1 h 后均逐渐酸化。(2) 动静脉血标本放置3 h 后RBC 刚性指数显著增高,变形指数则无显著变化。(3) 动静脉血标本放置1 h 后其RBC 膜Na +- K+-ATP 酶活性均显著下降。结果提示我们, 动脉血标本或静脉血标本放置过程中,其血酸碱度和氧含量, 以及RBC 流变性和膜Na +- K+-ATP酶活性均有变化,且变化趋势基本一致。血液pH的下降和氧含量的减少可显著影响RBC的流变性。可认为, 动静脉血标本放置1～3 h 后RBC刚性指数的显著增高和膜Na +- K+-ATP 酶活性的降低应与血液pH的下降和氧含量的减少密切相关。RBC流变性的变化反映了RBC 的性能及其在机体中的流动性。动静脉血标本放置1 h 后, 其RBC 膜Na +- K+-ATP 酶活性即开始显著下降, 但RBC 流变性(仅RBC刚性指数) 在其放置2 h 后才有所改变,其结果说明动静脉血标本放置1～3 h 过程中, RBC 膜能代谢的下降对RBC 性能的影响在2 h 后即可表现出来。综上所述, 为避免RBC 性能的变化, 在制备RBC药物载体时, 采集的动脉或静脉血的放置时间不宜超过2 h。
参考文献
1 Alpar HO , Lewis DA. Therapeutic efficacy of asparginase encapsulated in intact erythrocyes[J ] . Biochem Pharmaco. 1985 ,34 :257～260
2 Deloach JR , Corrier DE. Subcutaneous administration of carrier erythrocytes :slow release of entrapped agent[J ] . Biotechnol Appl Biochem. 1988 ,10 :359～362
3 汪小海, 骆璇, 朱世俊, 等. 红细胞作为吗啡载本的包蔽效果、术后镇痛时效及药代动力学研究[J ] . 数理医药学杂志. 2000 , 13(5) : 439～440
4 董卫. 人红细胞(Na + , K+ ) - ATP 酶活力研究[J ] . 生物化学与生物物理进展. 1983 ,10(3) :31～33
作者单位:210008 江苏南京,南京大学医学院附属鼓楼医院
