福建医科大学附属协和医院(350001) 陈丹玲
福建省妇幼保健院(350001) 薛晓光
摘 要 目的 应用ELISA检测SLE患者多种自身抗体,比较ANA和抗ds-DNA分别使用两种方法的检测灵敏度和稳定性。方法 ELISA(美国MBI药盒)检测ANA、ds-DNA、抗ENA、抗Sm、抗SmRNP、抗SSA/Ro和抗SSB/La;免疫萤光法检测ANA(IFANA);RIA检测抗ds-DNA。结果 ELISA检测131例SLE患者ANA、抗ds-DNA、抗ENA、抗Sm、抗SmRNP、抗SSA/Ro和抗SSB/La的阳性率分别为93.1%、74.8%、86.3%、34.4%、44.3%、52.7%和16.8%,IFANA阳性率为69.5%,RIA检测抗ds-DNA阳性率为51.9%。70例对照组各项检测均阴性。结论 ELISA检测SLE多种自身抗体,具有较高的灵敏度和稳定性,对SLE的诊断、治疗和科研都具有很大意义。
关键词 SLE 多种自身抗体
系统性红斑狼疮(SLE)是一种慢性多系统性疾病,伴有多种自身抗体。近年来用于检测SLE多种自身抗体的方法很多,但试剂灵敏度和稳定性各异,判断标准不一。本文选用美国MBI公司的ELISA试剂盒检测血清抗核抗体(ANA)、ds-DNA及抗ENA各种成分的多种自身抗体,分别进行了ANA的ELISA与免疫荧光(IFANA)、抗ds-DNA的ELISA与RIA的两种方法比较。实验结果表明ELISA更具灵敏度、稳定性和客观性方面的优点,并对131例SLE患者的各项自身抗体检测结果进行临床分析。
1 材料和方法
1.1 标本来源:131例SLE患者血清来自协和医院确诊的住院患者,其中女113例,男18例,女∶男=6.3∶1;年龄16~58岁,平均37.76岁。对照组70例系健康体检正常者,其中男28例,女42例;年龄20~56岁,平均29.7岁。
1.2 试剂:ANA、ds-DNA、抗Sm、抗SmRNP、抗SSA/Ro、抗SSB/La的ELISA试剂盒系美国MBI公司出品,各项检测均严格按操作说明进行各种测定和判断。免疫荧光抗核抗体(IFANA),按全国临床检验操作规程[1]自制鼠肝印片进行检测。RIA抗ds-DNA系中国原子能科学研究院同位素研究所放免试剂盒。
1.3 仪器:EL311s酶免疫测定仪:美国BIO-TEK INSTRUMENTS公司产品。荧光显微镜:德国LEITZLABORLUXK产品。γ放射免疫计数仪:西安二六二厂产品。
2 结果
131例SLE患者多种自身抗体检测结果,见附表。70例对照组各项检测结果均阴性。
附表 131例SLE多种自身抗体阳性率
| 项目 | 方法 | 阳性例数 | 阳性率(%) |
| ANA | ELISA | 122 | 93.1 |
| ANA | IF | 91 | 69.5 |
| 抗ds-DNA | ELISA | 98 | 74.8 |
| 抗ds-DNA | RIA | 68 | 51.9 |
| 抗ENA | ELISA | 113 | 86.3 |
| 抗Sm | ELISA | 45 | 34.4 |
| 抗SmRNP | ELISA | 58 | 44.3 |
| 抗SSA/Ro | ELISA | 69 | 52.7 |
| 抗SSB/La | ELISA | 22 | 16.8 |
3 讨论
SLE是一种累及多系统、多器官、有多种自身抗体的自身免疫性疾病,其不同组合的抗原抗体系统(Ag-Abs)组分可引起不同的临床表现。随着Ag-Abs检测的不断深入,它们滴度差异和是否阳性,常和病情、症状有密切联系[2]。
本文同时应用ELISA和IFANA两种方法检测SLE患者的血清ANA,比较其阳性率分别为93.1%和69.5%。IFANA由于抗原片来源不同,临床阳性率报道不一,本文与张晓慧报道61.0%基本一致[3]。而ELISA检测ANA则一致于Beutner等提出的SLE的ANA阳性率可高达90~100%[4]。ELISA和RIA检测抗ds-DNA的阳性率分别为74.8%和51.9%,均显示较短膜虫法阳性率28.5%[5]高,抗ds-DNA其ELISA阳性率高于本文RIA 51.9%及报道的RIA抗ds-DNA 64.50%[5]。
检测131例SLE患者抗ENA阳性率为86.3%,略高于免疫印迹法(IBT)68.24%[6]和71.7%[7]。抗Sm抗体对SLE的诊断有一定特异性,阳性率30~40%,阳性者血管炎、内脏病发病率较高,对治疗反应较差。抗Sm抗体常与抗U1RNP抗体在一起,SLE者抗U1RNP、抗Sm抗体有特异性结合多种SnRNP多肽能力,两种抗体结合多肽时形成共同表位[2]。本文检测结果抗Sm34.4%,抗SmRNP44.3%。抗SSA/Ro、抗SSB/La在SLE患者的阳性率大约为35~40%和15%[4]。1982年鸟田氏报道SLE的抗SSA/Ro为54%,本文两者分别为52.3%、16.8%。抗SSA/Ro与鸟田氏报道一致,高于国内免疫印迹方法的有关报道[6、7]。抗SSA/Ro可通过胎盘,该抗体阳性的孕妇,其婴儿患皮肤红疹及先天性房室传导阻滞的危险大大增加,SLE患者出现抗SSA/Ro阳性时,并常有皮肤光敏感和肾脏受累。单纯抗SSB/La阳性者病情多较轻[4]。
应用ELISA检测SLE多种自身抗体,显示了较高的阳性率、操作的方便性和稳定性,特别是将ANA、抗ds-DNA、抗ENA三项联合检测应用于临床SLE病人的初筛,有助于提高初诊的准确性,能提供SLE病人有力的实验室诊断依据,更进一步行各种自身抗体检测分析,对SLE的诊断、治疗及临床科研都具有很大的意义。
参 考 文 献
1.叶应妩,王疏三,主编.全国临床检验操作规程.南京:东南大学出版社,1991,327.
2.卢君健.系统性红斑狼疮核抗原抗体系统检测的临床意义.实用内科杂志,1988;8(4)∶199.
3.张晓慧.END抗体检测在诊断结缔组织疾病的价值.上海医学检验杂志,1992,7(7)∶22.
4.姚凤祥.现代风湿病学.第1版.北京:人民军医出版社.1995.187.
5.董静懿.短膜虫片酶标SPA法检测ds-DNA抗体.上海医学检验杂志,1994,9(1)∶17.
6.汪新义.免疫印迹法检测SLE患者血ENA抗体与临床关系的研究.临床皮肤科杂志,1996,25(51)∶261.
7.李培成.SLE患者的ENA多肽抗体的检测.上海免疫学杂志,1993,13(1)∶33.



