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正确选择血标本的思考


[ 来源:本站 | 作者:贺石林1,葛金文2 | 时间:2006-12-30 14:03:54 | 浏览: ]

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循环着的血液在维持机体稳态中处于关键地位。绝大多数疾病的发生发展在血液中都有一定的反映。因此,血标本的正确选择对于临床检验和医学科研具有重要意义。

全血、血浆与血清的选用原则

医学科研和临床检验的目的是为疾病的诊断、治疗、预防及预后判断提供可靠的依据。因此,保持待测体液组成与体内实际情况的一致性是必须遵循的基本原则。

从专业角度考虑,凡是涉及血细胞计数、血细胞表面抗原和受体以及血细胞内容物测定的检测,无疑应当选择抗凝全血。至于涉及血液的液体成分,究竟应当选择血浆抑或血清,主要取决于该指标的性质和检测的目的[1]。例如涉及凝血和抗凝的指标,无疑应当选择血浆;涉及免疫成分的指标,绝大多数宜选用血清。凡是可能受到凝血过程影响的指标,应当尽量选择血浆;凡是待检物既不受凝血过程影响.也不会因制备血清而改变的指标。可以使用血清或血浆。由于药物浓度在血清与血浆中并不相等[2],故药代学与药效学观察,通常宜首选血浆[3]。但不同抗凝剂的作用机制不同。乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acidEDTA)、草酸盐与柠檬酸盐是螯合Ca2+,且螯合程度为EDTA>草酸盐>柠檬酸盐。肝素通过与抗凝血酶结合而灭活丝氨酸蛋白酶(FaFXaFaFa)。水蛭素是特异性灭活Fa。因此,抗凝剂的正确选择十分重要。例如副氧酶(paraoxonasePON)-1的活性和稳定性需要Ca2+,不宜使用Ca2+螫合剂抗凝。应该选用肝素抗凝。细胞因子测定在缺乏游离Ca2+条件下较稳定,则宜选用EDTA抗凝,血小板聚集需低浓度Ca2+,则应选用柠檬酸盐抗凝。

采用血浆的优点及应注意的问题

就人体与动物而言,体内并不存在血清,所有血中非细胞成分均存在于血浆中,这就是实实在在的情况,但是要完全做到与体内一致性是不容易的。因为穿刺取血时,局部血管壁受损,总有一定程度的血小板和凝血因子活化。倘若注射器或容器中不含抗凝剂.这种活化过程必然继续下去直至血液凝固,势必引起一系列改变,这些改变在正常人和绝大多当选患者实际是不存在的。所以,为保持与体内实际情况一致性,凡血清或血浆均可使用的指标,应当尽量以血浆作为首选;其次,与血清相比,血浆制备简单且快速省时.这对临床及时诊治疾病大为有利。此外,相同容量血液,获得血浆的量通常较血清多15-20%,这对婴幼儿多项临床检验同时进行十分有利。同样对于实验室小动物科研也大有帮助。但任何事物都是一分为二的,使用血浆时由于抗凝剂的作用,可能干扰某些分析方法或改变成分含量,包括:①阳离子(NH4+Li+Na+K+)沾染;②金属离子与EDTA或柠檬酸盐结合可能干扰某些实验(如与锌结合抑制碱性磷酸酶、金属蛋白酶活性及金属依赖性细胞功能试验等);③纤维蛋白原干扰某些免疫试验;④肝素抑制某些生化反应(为抑制PCR中的Taq聚合酶);⑤EDTA和柠檬酸盐可能干扰某些离子分布(NH4+Cl);⑥只有去纤维蛋白原后,才能进行蛋白电泳。使用血浆时应当设法避免这些干扰。但在设有参比对照的条件下,这些干扰是可以抵销的。然而血清由于制备需时较长,凝血速率易受其他因素影响(如温度、pH、离子强度、药物对丝氨酸蛋白酶活性作用等),因此血清试验的齐同对比较难做到。不完全凝血离心后,血清中含有可溶性纤维蛋白,可呈现心肌肌钙蛋白I(cTnI)假阳性[4];血清中cTnI测定值大多高于血浆[5],因此,美国临床生化标准研究院推荐cTnl测定宜用血浆[6]

血清药理学与血清蛋白质组学问题

WHO专题综述报告在前言中强调指出:“由于历史的缘故,有关血液标本的化学检验通常采用血清,现在许多实验室倾向于采用血浆。”这是现代趋向的一种反映。还有两个相关的问题值得商榷,其一是血清药理学方法,对此我们已有专文探讨7。质疑血清药理学的主要理由包括:①从胃肠道吸收的中药成分在体内实际是进入血浆,而不是血清;②凝血过程有一系列蛋白酶生成,同时刺激白细胞及血小板释放溶酶,有些酶可能降解某些中药成分;③凝血酶刺激血小板与白细胞释放大量生物活性物质;④凝血过程伴有纤溶、补体、激肽等系统活化;⑤制备和灭活血清过程会导致中药成分与中药介导体内释放内源性物质的损失。并利用HPLC-MS指纹图谱分析与抗白血病细胞增殖试验证明利用血清药理方法可能带来错误结论。最近大黄庶虫丸血浆药理学与血清药理学方法比较结果也表明HPLC-MS指纹图谱分析与抗白血病细胞增殖试验证明利用血清药理方法可能带来错误结论。最近大黄虫丸血浆药理学与血清药理学方法比较结果也表明血清药理学在某些医学实验中是行不通的[8]。因此,对于中药半体内实验而言,有必要开展血清与血浆药理学方法的对比研究。另一是血清蛋白质和肽类组学方法问题。基于血清与血浆在蛋白质组成上也存在明显差别,根据待检标本应当与体内实际情况一致性的原则,在一般情况下也应当首选血浆蛋白质组学方法。但是对于存在高凝倾向的疾病(包括血栓前状态、恶性肿瘤等)或研究抗栓药物,使用血清蛋白质组学方法可能有利于疾病的早期诊断与药物作用靶点的明确。

总之.无论在临床或科研对于血液标本都需要正确选择。目前这一领域有关研究尚处于不完善状态.许多问题尚待从广度与深度进一步开展工作。

 

[参考文献]

 

[1]  贺石林,葛金文.临床检验和医学科研中血浆标本的检测价值[J].诊断学理论与实践,20054(6)513-516

[2]  Ebert SCLeroy MDarcey BComparison of aminoglycoside concentrations measured in plasma versus serum[J1Ther Drug Monit1989,1 l(1)44-46

[3]  Gaussem PReny JLThalamas Cet a1The specific thromboxane receptor antagonist S 18886pharmacokinetic and pharmacodynamic studies [J]J Thromb Haemost2005,3(7)1437-1445

[4]  Nosanchuk JSCombs BAbbott GFalse increases of troponin I attributable to incomplete separation of serum[J]Clin Chem1999,45(5)714

[5]  StieglerHFischer YVazquez-Jimenez JFet a1Lower cardiac troponin T and I results in heparin-plasma than in serum[J]Clin Chem2000'46(9)1338-1344

[6]  Wu All,:Apple FSGibler WBet a1National Academy of Clinical Biochemistry Standards of Laboratory Practicerecommendations for the use of cardiac markers in coronary artery diseases [J] Clin Chem.1999,45(7)l 104-1[2]

[7]  贺石林,葛金文,贺蓉,等.质疑血清药理学,加强多 层次半体内实验研究[J].中国药理学通报,2005,21(3)277-279

[8]  王东生,陈方平,贺石林,等.大黄唐虫丸血浆药理学与血清药理学作用的比较研究[J].血栓与止血学,200511(1)5-8

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