试剂标准操作规程
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项 目
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ß2微球蛋白BMG
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方 法
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免疫比浊法
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编写人
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李伯利
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日期
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2006-04-01
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审核人
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李进
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日期
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2006-05-12
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批准人
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吴穷
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日期
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2006-05-23
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本规程自2006年6月01日起实施，每1年复审一次
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公司档案保管者
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唐婧娟
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公司总经理
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吴穷
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质管部试验室
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李跃进
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目 录
1．测原理
2．标本采集与处理
2.1 受检者的准备
2.2 静脉采血
2.3 抗凝剂
2.4 标本处理
3．试剂
3.1 试剂
3.2 校准血清
3.3 试剂与校准血清的稳定性
4．仪器
5．操作
6．计算
7．操作性能
7.1 精密度
7.2 准确度
7.3 灵敏度
7.4 可报告范围
7.5 特异性
7.6 干扰
8．参考值
9．临床意义
附录A: 参数
1. 检测原理
570nm
样本中BMG + 试剂中BMG抗体 -----------------大分子免疫复合物
在570nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中BMG含量成正比。
1. 标本采集与处理
2.1 受检者的准备：
病人标本为2随机收集尿液或血清。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。
2.2 标本收集：
病人标本为24小时之内的尿液或随机收集尿液，尿液中避免其他物质，如：蛋白、血液等物质的干扰。
病人空腹12h，不饮酒24h后采集血清。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。
2.3 抗凝剂：
最好使用血清，或者使用EDTA作为抗凝剂。
2.4 标本处理：
血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂
3.1 试剂：
R1: BMG缓冲液：0.9%的氯化钠溶液。含有0.095%的叠氮化钠。
R2: BMG胶乳试剂：BMG抗体的聚苯乙烯胶乳颗粒悬浮液。
含有0.095%的叠氮化钠。
3.2：校准血清
使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：
空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性：
原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。
试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为乳白色，当试剂变色或出现沉淀，按照试剂失效处理。
多项免疫类标准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在2-8℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达6个星期的时间。
4．仪器
KONELAB 30型号仪器。
性能：波长570nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。
5．操作
样品为血清。本法为免疫比浊法。参数见后附，附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。
6．计算
计算吸光度的差值（OD2－OD1），并建立标准液吸光度－浓度工作曲线。
计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值（mg/L）。如标本的吸光度值大于标准液的最大值，则需稀释标本后，重新测量。
7．操作性能
7.1 精密度：
批内CV< 2.35%，批间CV< 4.45%（BMG浓度高于3.0 mg/L）。
7.2 准确度：
检测结果的相对不准确度≤±10%。
7.3 灵敏度：
当BMG浓度为1.59mg/L，吸光度约为0.29～0.31。
7.4 可报告范围：
样本与试剂用量之比为1:50时，测定下限为12.5mg/L。
7.5 特异性：
测量值在给定值的90%～110％范围内。
7.6 干扰：
内源性干扰物溶血为800mg/ml、脂血1000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。
8．参考值
随机尿液为：0.1～0.3 mg/L；24小时尿液为：0.03-0.37mg；血清为1.0-3.0 mg/L，
9．临床意义
2-微球蛋白（BMG）是一种几乎在所有的体细胞的细胞膜上都存在的低分子量（11000道尔顿）的蛋白质。游离的b2--微球蛋白是细胞裂解的产物。它是由肾小球分泌的，然后被肾小管细胞吸收和分解。肾小球过滤功能可以降低血清中出现高浓度的 BMG, 肾小管功能异常，血清中BMG、正常尿液中的BMG的浓度升高。细胞破碎后，它的浓度显著升高, 如在急性白血病中血清中BMG浓度升高。
附录A: 参数
