试剂标准操作规程
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项 目
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载脂蛋白B（APOB）
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方 法
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免疫比浊法
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编写人
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李伯利
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日期
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2006-04-01
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审核人
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李进
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日期
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2006-05-12
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批准人
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吴穷
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日期
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2006-05-23
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本规程自2006年6月01日起实施，每1年复审一次
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公司档案保管者
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唐婧娟
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公司总经理
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吴穷
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质管部试验室
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李跃进
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目 录
1. 检测原理
2. 标本采集与处理
2.1 受检者的准备
2.2 静脉采血
2.3 抗凝剂
2.4 标本处理
3. 试剂
3.1 试剂
3.2 校准血清
3.3 试剂与校准血清的稳定性
4. 仪器
5. 操作
6. 计算
7. 操作性能
7.1 精密度
7.2 准确度
7.3 灵敏度
7.4 可报告范围
7.5 特异性
7.6 干扰
8. 参考值
9. 临床意义
附录A: 参数
1. 检测原理
APOB与特异的抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm测定该不溶性复合物的浊度。通过测定标准品，建立一个吸光度对APO B浓度的标准曲线就可以测定出样品中的APO B浓度。
2．标本采集与处理
2.1 受检者的准备：
病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：
除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：
血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：
血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂
3.1 试剂：
本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司APOB试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：
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组 成
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混合后的浓度
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R1: 聚乙二醇
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<4%
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氯化钠
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106mmol/L
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Tris/HCL 缓冲液
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15mmol/L
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R2: 抗人APO B抗体
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表面活性剂
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3.2：校准血清
使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：
空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性：
原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。
试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色至浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。
项血脂类标准液或APOA/B标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，2-8℃储存可稳定一周，参见校准血清说明书。
4．仪器
KONELAB 30型号仪器。
性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。
5．操作
样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。
6．计算
△A测定
C = ———— × C0
△A标准
式中：c—— 测定血清载脂蛋白B浓度，g/L；
△A测定—— 标本管吸光度；
△A标准—— 标准管吸光度；
CO—— 校准血清中载脂蛋白浓度，g /L；
△A ＝A2－A1
7．操作性能
7.1 精密度：
批内CV< 1.32%，批间CV< 3.35。
7.2 准确度：
检测结果的相对不准确度≤±10%。
7.3 灵敏度：
载脂蛋白B浓度为：1g/L时，浊度吸光度A340nm约0.372~0.454 。
7.4 可报告范围：
血清与试剂用量之比为3:250:50时，测定上限为2.24g/L。
7.5 特异性：
测量值在给定值的90%-110％范围内。
7.6 干扰：
内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。
8．参考值
0.6-1.14 g/L
9．临床意义
载脂蛋白B 测定试剂盒用于定量测定血清中载脂蛋白B的含量。
载脂蛋白B是低密度脂蛋白（LDL）的主要成份。APO-B的浓度与动脉硬化相关联，是评价冠心病的有效指标。目前的研究结果表明：冠心病患者一般具有比较低的APO A-1水平和比较高的APO- B水平。
附录A: 参数
