试剂标准操作规程
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项 目
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肌酐（CRE）
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方 法
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苦味酸法
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编写人
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李伯利
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日期
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2006-04-01
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审核人
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李进
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日期
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2006-05-12
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批准人
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吴穷
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日期
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2006-05-23
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本规程自2006年6月01日起实施，每1年复审一次
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公司总经理
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吴穷
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公司档案保管者
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唐婧娟
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质管部试验室
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李跃进
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目 录
1. 检测原理
2. 标本采集与处理
2.1 受检者的准备
2.2 静脉采血
2.3 抗凝剂
2.4 标本处理
3. 试剂
3.1 试剂
3.2 校准血清
3.3 试剂与校准血清的稳定性
4. 仪器
5. 操作
6. 计算
7. 操作性能
7.1 精密度
7.2 准确度
7.3 灵敏度
7.4 可报告范围
7.5 特异性
7.6 干扰
8. 参考值
9. 临床意义
附录A: 参数
1. 检测原理
在碱性溶液中，苦味酸盐与肌酐作用，生成黄红色的苦味酸肌酐复合物，测定510nm波长下复合物吸光度的变化与同样处理的肌酐标准液相比较，即可测出血清中肌酐的浓度。
碱性
肌酐 + 苦味酸 ----------- 肌酐-苦味酸复合物 (黄红色)
2．标本采集与处理
2.1 受检者的准备：
病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：
除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：
血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。
2.4 标本处理：
血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂
3.1 试剂：
本科使用湖南永和阳光科技责任公司CRE试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：
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组 成
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R1:R2=1:1（混合后的浓度）
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R1: 氢氧化钠
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0.3mmol/L
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硼砂
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0.1mmol/L
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R2: 苦味酸
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49mmol/L
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肌酐标准液 132.4 umol/L
3.2：校准血清
使用湖南永和阳光科技责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：
空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性：
原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。
试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。
多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。
试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。
4．仪器
KONELAB 30型号仪器。
性能：波长510nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。
5．操作
样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为氧化酶法。参数见后附，附录A。
6．计算
ΔA测定
C = ———— × C o
ΔA标准
式中：c—— 测定肌酐浓度，μmol/L； ΔA＝A2-A1
ΔA测定—— 标本管吸光度变化； ΔA标准—— 标准管吸光度变化；
CO—— 校准血清肌酐浓度，μmol /L；
7．操作性能
7.1 精密度：
批内CV≤8.3%，批间CV≤10.2%。
7.2 准确度：
检测结果的相对不准确度≤±10%。
7.3 灵敏度：
肌酐浓度为：111.5g/L时，吸光度变化率为0.0067～0.0069/分钟。
7.4 可报告范围：
样本:R1:R2=1:5:5时，测定上限为884μmol /L。
7.5 特异性：
该方法只和待测样本中的肌酐发生反应，不与其它物质反应。
7.6 干扰：
内源性干扰物溶血为500mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。
8．参考值
男：44.0～133.0μmol /L；女：70.0～106.0μmol /。
9．临床意义
肌酐测定试剂盒用于定量测定人体血清中肌酐的含量。
肌酐是肌酸代谢的最终产物，由肾脏排出。血清肌酐来自肌肉中的肌酸和磷酸肌酸。临床上测定肌酐含量主要用于检测肾功能的变化，以检测肾功能处于潜在的衰竭状态或是在改善之中。
1）当急、慢性肾小球肾炎等使肾小球滤过功能减退时，血肌酐可升高。同时应在已知
内生肌酐清降率的基础上穿插着测定血肌酐作为追踪观察的指标。
2）尿素氮与肌酐同时测定更有意义，如二者同时升高，说明肾脏有严重损害。
附录A: 参数
