陈建华 梁勇
Determination of the content of vitamin C from compound vitamin tablet by using high performance liq-uid chromatography.CHEN Jian-hua，LIANG Yong.（Department of Quality Control of Hainan Yangsheng-tang Parmaeutical Co.Ltd，Haikou570311，Hainan，P.R.China）
摘要:目的 建立测定复合维生素咀嚼片（果味型）中Vc含量的HPLC测定方法。 方法 用ODS Hypersil，5μm，150×4mm，以0.1%草酸溶液为流动相，在254nm波长检测。 结果 Vc的线性范围为1.708～8.540μg/ml;r=0.9994;平均加样回收率为99.80%;RSD%=0.40（n=5）。 结论 HPLC方法测定复合维生素咀嚼片Vc含量简便，快速，准确。
关键词:维生素C;高效液相色谱法（HPLC）;复合维生素咀嚼片
成长快乐复合维生素咀嚼片（果味型）是以维生素A、维生素D、维生素E、维生素B 1 、维生素B 2 、维生素B 6 、维生素B 12 、维生素C，叶酸，泛酸钙为主要原料，辅料以山梨糖醇、全脂乳粉、苹果酸等，经科学加工精制而成的营养补充剂。
1 材料与方法
1.1 仪器 美国HP1100液相色谱仪（HP1100四元泵，7725i六通阀，HP1100真空脱气机，HP1100，Diode Array Detector，HP化学工作站）。
1.2 试药 维生素C对照品（Sigma公司），双重蒸馏水，草酸（优级纯），其他试剂均为分析纯，成长快乐复合维生素咀嚼片（果味型）（海南养生堂药业有限公司，批号040601，040602，040603）。
1.3 色谱条件 Waters公司Noca-pak C18（4.0mm，3.9×150mm）Column，流动相为0.1%草酸，流速0.6ml/min，检测波长为254nm，灵敏度为0.05AUFS，柱温为25℃。以Vc峰面积计算，理论塔板数大于2000。Vc与其他杂质峰的分离度大于1.5 ［1］ 。
1.4 维生素C对照品溶液的制备 取经常温干燥恒重的维生素C对照品，精密称取4.27mg，置于50ml容量瓶中用0.1%草酸溶液定容，超声5min溶解，对照品储备溶液为0.0854mg/ml。
2 结果与分析
2.1 线性关系 精密吸取对照品储备溶液2、4、6、8、10ml，分别置于10ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别吸取10μl注入高效液相色谱仪，测量峰面积，回归方程为A=2560987C+30690，r=0.9994，见表1。
表1 线性相关性测定结果 变量 吸取量（ml）（略）
结果表明，进样浓度在0.01708～0.08540μg/ml的范围内浓度与峰面积有良好的线性关系。
2.2 样品的测定 测定3批样品结果含量（mg/粒）各为:1.201，1.198，1.189。
2.3 精密度试验 精密吸取维生素C对照品4.93mg，置10ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。分别取10μl重复进样6次，测得峰面积为:1345372，1347268，1342647，1341124，1334792，RSD=0.43%。试验结果显示仪器精密度良好。
2.4 重现性试验 取批号为040602的样品测定5份，重现性实验结果:称样量分别是2.9376g、3.0054g、2.9851g、3.0164g、3.0147g，测定含量分别为1.151mg/粒，1.168mg/粒，1.171mg/粒，1.163mg/粒，平均每粒含量为1.162mg，试验结果表明，测定结果重现性良好，RSD=0.70%。
2.5 稳定性试验 取批号为041020的供试品溶液在0～8h内进样5次（0，2，4，6，8h），测得峰面积分别为:1926564，1930130，1912404，1927451，1911124，RSD=0.52%。结果表明，供试品溶液在8h的稳定性良好。2.6 加样回收率 取批号为040602的样品（含量为1.16mg/粒）约1.5g5份，分别加入浓度为0.4191mg/ml的维生素C对照品0.1%草酸溶液100ml。按上述方法测定，平均回收率为99.80%，RSD=0.40%。表明该方法回收率良好。见表2。
表2 回收率试验结果（n=5）（略）
3 结论
维生素C在中性或碱性溶液中易变质，加入0.1%草酸溶液，可减少其变质。应用HPLC法测定其含量比碘量滴定法，准确、快捷、灵敏度高，适用性好。
参考文献:
［1］《中华人民共和国国家标准》［S］.GB/T5413，18-1997:77.
作者单位:海南养生堂药业有限公司质量部，海南海口 570311
