作者：刘振北　周仲民    文章来源：中国输血杂志
    检测梅毒螺旋体的方法有快速血浆反应素卡片试验（RPR）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）。RPR法和TRUST法为非特异性血清试验，敏感性及特异性较差，肉眼判断结果易受检测者的主观性影响，易出现漏检和误判。笔者采用梅毒螺旋体酶联免疫试验（TP-ELISA）与TRUST法进行比较，现将结果报告如下。

  1　材料和方法

　　1.1　标本来源　经TRUST检测为阳性的献血者血样24份；经临床确诊的梅毒患者血样本24份；无偿献血者血样107份。

　　1.2　试剂及仪器　TRUST试剂盒：上海荣盛生物技术公司， 批号为990101，批批检合格；北京万泰生物技术公司，批号为901701 ，批批检合格；TP-ELISA试剂盒：厦门新创科技公司，批号：9011601；确证试剂TPHA：由英国RANDOX公司生产，批号6980。质控血清（2NCU/ml）批号为9812,购自卫生部临床检验中心。 DENLEY W4洗板机；BIO-RAD Model 550酶标仪。

　　1.3　方法

　　1.3.1　TRUST检测　严格按试剂盒说明书操作。+/-的判断：实验结束时观察到不明显的阳性反应。阳性样本复试后留样。

　　1.3.2　TP-ELISA检测　严格按试剂盒说明书操作。酶标仪测光密度（OD值），以cut off值为界判断结果。

　　1.3.3　确证试验　将经TRUST及TP-ELISA检测阳性的样本用TPHA试剂严格按试剂盒说明书操作作确证。

　　2　结果与讨论

　　ELISA法与TRUST法检测梅毒结果比较见附表。

附表　ELISA法与TRUST法检测梅毒结果比较
                                      TRUST             ELISA               TPHA
                     － ＋ ＋         － － ＋           － － ＋

临床梅毒患者                24  0  24         0   0 24         0  24  0

TRUST法阳性献血者     24  0  18    　 6* 2 22          4 19  1

无偿献血者                   107 107 0        0   0 107        0   —    —

质控血清（2NCU/ml）    1   1   0          0    0  1           0   1   0

合　计                       156 108 42        6 109 47        4  44 1

　*　1例重离心后复试为阴性　　TRUST法和RPR法为非密螺旋体抗原试验，两种试验具有相同的标准化的抗原，所以敏感性相似［1］。由于感染梅毒后心磷脂抗体出现晚于特异性抗螺旋体抗体，而晚期梅毒及治疗后梅毒这类抗体有可能转阴。因此这类试验不适合一期梅毒早期、三期梅毒及治疗后梅毒；对潜伏性梅毒和神经梅毒也不敏感［2，3］。TP-ELISA试验是梅毒特异性抗原包被在微孔板上，测定梅毒感染的特异性抗体，是特异性密螺旋体抗原试验，对梅毒感染的敏感性高，特异性强。笔者的试验结果中，TRUST检测阳性的42例样本经TPHA 确证为阳性的41例、阴性1例，而TRUST法可疑（+/－ )的6份样本以TPHA 确证为阳性的2例、加原有阳性41例共43例；可疑（+/－）1例；阴性3例、加原有阴性1例共 4例属TRUST法假阳性、假阳性率8.3%(4/48)。ELISA法检测阳性的47例样本经TPHA 确证为阳性的44例、1例可疑（+/－）、2例阴性，假阳性率4.3%(2/47)。2NCU/ml 质控血清TRUST法检测阴性，ELISA和TPHA检测为阳性。结果表明ELISA法的敏感性和特异性高于TRUST法。 

　　本组试验结果显示TRUST及TP-ELISA均有生物假阳性（BFD）现象。国内报道［4，5］献血者梅毒筛查阳性中的BFD率为30%～31%，笔者的结果两种方法的BFD率分别为26.7%（4/24）和9.1%(2/22)。所以，经TP-ELISA检测为阳性的样本也应以TPHA 试验确证。 TRUST试验血浆中纤维蛋白易影响检测结果的观察而致误判。在检测判为+/－的6份样本中，两份经TP-ELISA检测为阴性，TPHA检测证实为阴性，将样本重离心后以TRUST复试，其中1例结果为阴性。ELISA法检测取样量少，不受样本中纤维蛋白和溶血等影响，结果用酶标仪分析，客观而准确。

　　综合上述，笔者认为TP-ELISA不仅灵敏度高、特异性强，而且操作简便，一次可完成多份标本的检测。更适合于血站自动化系统检测与微机管理。

参考文献

　　1，Van der Sluis JJ.梅毒的实验室诊断技术.国外医学皮肤性病学分册,1994，20（1）∶33

　　2，杨文林， 杨　健， 刘丹莹，等. 早期梅毒治疗前后血清学分析.临床皮肤科杂志,1998，27（5）∶314

　　3，王薇缓 .我国梅毒诊断试剂的质量现状. 1996年国家批批检诊断试剂会议资料汇编，北京：1996，38

　　4，付海军，王忠发．献血者梅毒反应素检测及确证试验．中国输血杂志，1997，10（2）∶86

　　5，邱　艳，郑　静，高东英，等．对血站采用非特异性血清试验筛选血液结果的评价．中国输血杂志，1998，（1）∶27