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实验室外的质量保证


[ 来源:本站 | 作者:不详 | 时间:2005-12-13 09:30:56 | 浏览: ]

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四川省医学科学院 四川省人民医院  检验科袁红
 

    
 
实验室内的质量管理是保证检验质量的关键,随着自动化仪器的使用,高质量商品化试剂盒的选用,人员素质的提高,分析过程中质量提高较快。但对于实验前后的质量管理还未引起足够的重视,实验前后的质量管理又称分析前、分析后的质量管理。
根据国外有关作者的报道:
 
分析前的质量问题主要有:
检测项目不必要重复(占1.9%)
采集标本不规范(占6.8%)
采集时间不对(占2.2%)
标本收集后未及时检测(占22.1%)
标本不合格(占2.3%)等
约占分析前、后的三分之一左右。
分析后的问题主要有:
未完成项目的(占2.9%)
未及时发出报告(占35.7%)
报告未进电脑的(占3.5%)
异常结果未及时报告(占2.3%)等
 
分析前的质量管理应包括:
临床医师正确选择检验项目
病人准备
标本采集
标本运送
标本保存等
任何一个环节处理不好,都会影响检验结果的准确性。

一、实验室的误差来源
 
(一)能力对比检验的分析质量要求
各检测项目因测定方法、检测手段不同,其变异程度有所不同。美国使用能力对比检验,对各检测项目的实验分析质量作了明确的要求,即检测结果在可接受范围内检测误差是允许的,我国现已借用此方案来要求我国实验室(见表1)。
 
表1  美国CLIA’88能力对比检验的分析质量要求
分析物或试验                            可接受范围
常规临床化学
谷丙转氨酶
靶值±20%
白蛋白
靶值±10%
碱性磷酸酶
靶值±30%
淀粉酶
靶值±30%
谷草转氨酶
靶值±20%
胆红素
靶值±6.84mmol/L(0.4mg/dL)或±20%(取大者)
血气PO2
靶值±3s
血气PCO2
靶值±5mmHg或±8%(取大者)
血气PH
靶值±0.04
靶值±0.250mmol/L(1.0mg/dL)
靶值±5%
胆固醇
靶值±10%
高密度脂蛋白胆固醇
靶值±30%
肌酸激酶
靶值±30%
肌酶激酶同功酶
MB升高(存在或不存在)或靶值±3s
肌酐
靶值±0.265umol/L(0.3mg/dL)或±15%(取大者)
葡萄糖
靶值±0.33mmol/L(6mg/dL)或±10%(取大者)
靶值±20%
乳酸脱氢酶
靶值±20%
LD同功酶
LD1/LD2(+或-)或靶值±30%
靶值±25%
靶值±0.5mmol/L
靶值±4mmol/L
总蛋白
靶值±10%
甘油三酯
靶值±25%
尿素氮
靶值±0.71mmol/L尿素(2mg/dL尿素N)或±9%(取大者)
尿酸
靶值±17%
血液学
 
细胞识别
在分类上90%或更大的一致
白细胞分类
靶值±在不同类型白细胞百分数上的3s
红细胞计数
靶值±6%
血细胞容积
靶值±6%
血红蛋白
靶值±7%
白细胞计数
靶值±15%
血小板计数
靶值±25%
纤维蛋白原
靶值±20%
激活部分凝血酶时间
靶值±15%
凝血酶原时间
靶值±15%
一般免疫学
 
α1-抗胰蛋白酶
靶值±3s
抗核抗体
靶值±2个稀释或(阳或阴)
抗-HIV
反应或不反应
补体3
靶值±3s
补体4
靶值±3s
α-甲胎蛋白
靶值±3s
肝炎HbsAg,anti-HBc,HBeAg)
反应(阳性)或不反应(阴性)
IgA
靶值±3s
IgE
靶值±3s
IgG
靶值±25%
IgM
靶值±3s
传染性单核细胞增多(症)
靶值±2个稀释或(阳性或阴性)
类风湿因子
靶值±2个稀释或(阳性或阴性)
风疹(Rubella)
靶值±2个稀释或(阳性或阴性)
 
 
(二)生物学变异的影响
很多成份的生物学变异较分析变异大。若以变异系数(cv%)来表示,某人群中一些成份的生物学变异和分析变异如表2所示。
 
            表2  以CV%表示某人分析变异和群生物学变异
血浆成份              分析变异(%)             生物学变异(%)
0.31
1.16
0.94
8.15
总蛋白
1.63
5.11
1.11
2.33
胆固醇
8.90
17.30
2.70
15.00
尿素氮
2.06
25.80
尿酸
1.74
23.50
谷草转氨酶
3.50
38.70
谷丙转氨酶
6.80
55.20
 
表3  引起生物学变异的因素
年龄
空腹
侵害、打击
禁食
饮食
泌乳
海拨
药物
失重
绝经
噪声
月经
咖啡与咖啡因
  尼古丁
视觉缺失
肥胖
体重
维生素B6缺乏
    起立姿势
冲动
血压
环境
种族
肌肉锻炼
            月餐(吃饭咬合)
暴露于光线
生物律
发热
昼夜律
发冷
周节律
妊娠、双胎
季节律
血型
性别
血氧减少
吸烟
躺下不动
      身高、身材
 
二、分析前的质量保证
 
(一)临床医师正确选择检验项目
目前检验项目繁多,每一种试验都有其不同的临床意义。有的用于筛选,有的用于诊断,有的用于疗效观察和预后判断。由于检验医学飞速发展,临床上认识也常落后于实验医学的发展。因此,让临床医护人员了解诊断性试验的特异性、灵敏度、阳性拟然比和ROC曲线等试验特性,使他们在诊断时选用,看报告时分析参考。有的项目仅仅是筛选而己,不可作诊断依据,必须用某个确证试验来认可。如何将检测项目进行优化组合,使病人付出最低的费用,达到最佳的诊治目的,也是一项新课题,我们反对大包围的检查方法。同时,也要让临床医护人员了解不可拆分的实验组合。
 
(二)告诉病人作好采集标本前的准备
检验结果的准确性受多种因素的影响,有必要对各种影响因素进行分析,以便正确理解检测结果的变异。检验科人员及临床医护人员应充分理解,以便取得共同语言。
为了使检验结果如实地反映病人实际体内情况,要求病人积极配合,但我们必须做到耐心宣传,做好病人的思想工作和告知具体准备事宜。
    1、运动对检验结果的影响
检验前要求病人处于较好休息状态,不宜通宵达旦地打麻将、饮酒等娱乐活动,也不宜上了夜班后来检查。因为劳累后可使血浆葡萄糖、CK、AST、LDH等升高。
运动或重体力劳动,可使组织释放酶类增加,可使ALT、AST、LDH、CK、GLU等测定结果升高,甚至取血前一天晚上有过激烈运动都会影响到一些血液成分浓度的变化,其中以ALT及CK最为明显,可增加1倍以上,而激烈运动导致血管内溶血,受到影响的项目就更多。有人对40米慢跑前后血中Cr、Uear、K、P的浓度进行测定,发现均有不同程度的增高(见表4)。
 
表4  40米慢跑对部分生化项目测定结果的影响
项  目
Cr
Uear
K
P
增高程度(%)
45
31
23
65
 
因此,在取血的前一天晚上不应有激烈的运动,取血当日早晨不要走长路,尽量避免上下楼走动,取血前应有10分钟的休息。
长时间的体力活动还可使WBC、尿素、肌酐及乳酸增高,碳酸氢根减少。
2、 必须空腹采血的坚持空腹采血
如空腹血浆葡萄糖测定,一旦吃了早餐将会影响结果的价值。不少检验项目如生化测定也要求禁食12h后才能采血。
据文献报导餐后血中不但葡萄糖升高,而且钙、磷、胆红素、尿酸和白蛋白均有统计学上改变。
但空腹时间过长(超过16h),同样也会影响血液中成分,如血清白蛋白、补体、转铁蛋白及葡萄糖等含量下降。
3、要求当天早上只能进一点清淡饮食的,注意要询问是否钦用过牛奶、豆浆、鸡蛋等高脂肪、高蛋白之类食品,因为高脂肪饮食可使外源性乳糜微粒、甘油三脂升高,并将影响肝功、免疫球蛋白、血脂等测定。
同时要求停止饮用咖啡、浓茶类饮料,更不能饮酒。
4、为了准确测定血脂,要求病人积极配合,严格做到连续三天素食后才能采集标本。
5、做葡萄糖耐量试验或餐后两小时血糖的病人,一定要详细告诉病人何时服用葡萄糖,记录好时间,计划在何时抽血等事宜,必须争取病人的配合才能做好这些检查。
6、不少药物服用后均会影响检验结果,例如服用胆盐和氯丙嗪可使胆固醇浓度升高,肝素及甲状腺素可使血中胆固醇降低。服用大剂量Vit C可使酶法测定血中葡萄糖、胆固醇、甘油三脂的结果假性降低。应用大剂量青霉素后可使血中AST、CK、肌酐、总蛋白升高,白蛋白、胆红素降低,Vit C排至尿中可影响尿糖结果。为此要求病人仃用一切药物2天后才来采取标本,以免产生偏倚影响诊断和治疗。
药物及方法学因素对检测结果的影响。见表5
 
表5药物及方法学因素对尿液干化学检测结果的影响

项 目             假阳性                   假阴性
蛋白质             碱性尿                   本周蛋白
                  季胺盐                   粘蛋白
葡萄糖             双氧水                   VitC>750mg/L
                                          乙酰乙酸>400mg/L
                                          大剂量青霉素
                                          长期服用左旋多巴
                                      高比重尿(1.020以上)
胆红素             服用大剂量氯丙嗪         阳光照射、含硝酸盐
                                          VitC>250mg/L
尿胆原             胆红素                    服用PAS
              吩噻噻                   阳光照射
酮体               服用左旋多巴             苯丙酮酸尿症
                 头孢类抗生素              BSP
隐血               漂白粉                   高比重尿
                 双氧水                   高蛋白尿
                 不耐热酶                  VitC>100mg/L
                       肌红蛋白尿               福尔马林
白细胞             福尔马林                 高比重尿
                  呋喃坦啶                 庆大霉素
                       胆红素尿                  高浓度草酸
亚硝酸盐           尿放置过久细菌污染        VitC
 
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

总之,要做好病人思想和采集标本前的一切准备工作。
 
(三)采血时应注意事项
1、加强三查三对避免张冠李戴
无论门诊或住院部由于采血集中在清晨或上午,加强三查三对避免张冠李戴更为重要,此类差错时常都有发生,这样每次至少有2个人的结果受到影响。其责任在于工作人员身上。查对和询问病人姓名,准确填写和粘贴标签,需多次采样者,应注明采集时间或临床治疗状态。同时还应警惕病人冒名顶替的情况。
2、采集时间:错过特殊实验的最佳采血时间,影响阳性检出率,如疟原虫、微丝幼,血药的浓度检测等。
3、采血体位对结果的影响
抽血时病人用力攥拳,引起肌肉组织代谢活跃,加速钾从细胞内溢出速度从而使血钾浓度升高。
目前采用坐位和卧位较多。门诊采用站位采血的应该改为座式,因为站位既不安全又影响结果,它可使血中总蛋白、白蛋白、血脂、胆固醇、碱性磷酸酶、ALT,血清铁均有明显改变。
采血时由于定位或进针不准确,或由于患者配合不好(小孩哭闹)使血流受阻,导致凝固或溶血的发生,
    人的体位改变,也可引起一系列的生理变化,有些成分存在立位与卧位之间的差异。因为当人体从卧位改为立位时,血管内的水分进入到血管间隙内,这样不能被血管壁过滤的大分子,如蛋白质立位采血要比卧位采血浓度高,坐位或立位白蛋白参考值为37~52g/L,而卧位所采血测定的参考值为30~50g/L,而可以被滤过的小分子,如葡萄糖就不受体位的影响。
从立位改成卧位的情况正好相反,血管外的液体进入血管内,些时血液受到稀释,有些成分的浓度比立位时低或呈下降趋势(见表6),为了减少体位差异带来的影响。取血病人的体位应当固定,在取血前应有10分钟的时间稳定自己的体位,医护人员应知道如何去考虑这种差别。
 
表6 立位改为卧位时测定结果下降情况
测定项目
下降程度(%)
Ca
K
TP
ALb
chol
TG
ALP
ALT
0.99(2~7)
1(0~3)
9(7~10)
9(6.2~14)
0.23(5~15)
0.11(2~20)
9(5~11)
7(4~14)
 
4、不可边输液边取血
由于边输液边取血影响血糖、钾等浓度的情况时有发生。应规定如在一侧手臂输液时至少应从对侧手臂取血,以免影响某些项目的测定结果。有作者报告当输葡萄糖盐水时,如同侧采血,可使肌酐、尿素、氯等明显降低,血糖、尿酸、钾明显升高。
输液时抽血,来自液体成分的污染或被液体稀释。由于前臂静脉血管间存在广泛的联系,在一侧静脉输液时,即使另一侧抽血也会受到污染,有使用多孔导管,如多孔保留针,如果在输液外的另一孔抽血,也会污染血液标本和使标本稀释。最好办法是停止输液几分钟。
5、压脉带使用的时间
应用压脉带的目的是增加静脉局部充盈,有利于穿刺。如果压脉带压迫超过1min,可使局部血氧含量降低,乳酸增加,pH下降。
如果压迫3min后可使胆红素、胆固醇、AST、ALP等增加5% 以上。
正确的操作是先扎紧压脉带后观察血管走向,及时将压脉带放松,再进行消毒,待穿刺前再把压脉带扎紧,立即采血,采血动作迅速、一针见血,尤其对检测凝血象的标本尤为重要,力争1min内完成。
压脉带压迫时间不宜过长、过紧
压脉带使用时间过长,导致血液回流受阻,血管膨胀,使毛细血管内的血液压力增大和血流量下降,造成液体流失。静脉持续高压,组织回流水分和电解质减少、蛋白和蛋白结合物浓度升高;血流受阻,纤维蛋白的活性增高;细胞继续新陈代谢,使代谢产物乳酸增高等,因此,压脉带使用时间应少于1分钟,针头进入血管后,以放松压脉带为宜。
用压脉带时,发生局部缺血(缺氧),这样便会导致一些成分的浓度改变,如BuN在系压脉后80秒,浓度开始下降,120秒~200秒时可下降4%,到240秒时又恢复正常。在系压脉带3分钟后,ALB、Ca、ALP、AST、Fe、CHo等浓度可分别升高5%~10%,绷扎3分钟的明显会比1分钟缺氧严重,这时糖的无氧酵解增加,乳酸升高,PH下降,随之钙、镁离子与结合蛋白分离而释放,同样游离的药物浓度也会升高,因此推荐在针穿刺进血管后立即放松压脉带(<1分),以免引起血液淤滞,造成血管内溶血或血液某些成分改变。特别是测定乳酸时不可使用压脉带。
6、正确选用抗凝剂
    抗凝剂的选择:抗凝剂的种类较多,如选择不当,会影响检验结果的准确性。下面介绍几种生化检验常用的抗凝剂及其用途:
(1) 草酸钾:常用于尿素、肌酐、纤维蛋白原等测定,不能用钾、钙等测定,对LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。
(2) 肝素:常用于电解质、血气分析、血氨等测定。抗凝剂比例为50~61u肝素/5ml血。注意钠盐可使淀粉酶升高。
(3) 氟化钠:常用氟化钠—草酸钠混合抗凝剂作血糖测定的抗凝剂,氟化钠可以抑止烯醇化酶,它可避免血细胞葡萄糖酵解酶的作用,延长标本的保存时间。
(4) 二乙胺四乙酸钠盐(EDTA-Na2):生化常用的抗凝剂,但不能用于钙、钠、及含氮物质的测定,对淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ALP、5’-核苷酸酶等可抑制,对丙酮酸激酶有明显升高的作用。
(5) 枸橼酸钠,测定血沉用3.8%枸橼酸钠抗凝,抗凝剂与血液比例为1:4,凝血试验需用3.2%枸橼酸钠抗凝,比例为1:9。
(6) 实验室使用抗凝剂种类较多,血细胞分析及红细胞比积测定宜用EDTA·K2抗凝,保证室温下6小时RBC体积不变,抗凝剂比例为1.0~2.0mg/1ml血。
抗凝血凝固有以下几个原因:
(1)血流不畅,造成未和抗凝剂混匀就已凝固。
(2)抗凝剂量不够或失效。
(3)血样和抗凝剂没有完全混合好(尤其是固体抗凝剂,如血常规)或因工作人员失误忘记混合。
(4)压脉带使用时间过长,加速凝血反应。不易发现的微凝集会导致不正常结果的发生,比如微凝集对血常规、凝血系列的检测的影响。
(5)正确使用抗凝剂。通常情况下临床化验多采用血清作标本,不需要抗凝,但一些特殊检验项目需使用抗凝剂时,应注意选择合适的抗凝剂,并注意抗凝剂与血液的比例。防止标本凝血或红细胞形态改变。特别注意含有K盐Na盐的抗凝剂不能用于测定K+、Na+的标本,含有EDTA、草酸盐的不能用于测定Ca++的标本,因为Ca++可与它们形成不溶性物质。草酸盐、氟化物不能用于测定酶和用酶法测定的标本,因为它们有激活或抑制某些酶活性的作用,如草酸盐可抑制淀粉酶,酸性磷酸酶,乳酸脱氢酶活性。氟化物则有激活尿素酶,淀粉酶的作用。
7、多项化验采血顺序,抽血后首先将血注入血常规管,然后是其它抽抗凝管,最后是非抗凝管。
    8、防止污染
有些检查项目要求极严格,其采血器具及标本容器必须经过化学清洁。如血氨、铜、锌、铁等项目,因其含量极低,稍有污染即影响结果。作淀粉酶测定时,要防止唾液污染,因唾液中含有大量的淀粉酶,污染后会引起假性淀粉酶升高。
    9、采用真空采血系统是保证质量重要措施之一
    目前大力推广使用真空采血系统可有效避免用错抗凝剂,保证血与抗凝剂比例,解决交叉污染,防止标本溶血。冬天加分离胶可加速血清分离。
真空采血系统使用注意事项:
(1)注意采血的先后顺序
红头管→浅蓝头→紫头管→绿头管→黑头管→金黄头,最后一管应在取下试管后拔出采血针,以防血液返流
(2)严格按照采血管标定的采血量采取标本,尤其是抗凝采血管
(3)抗凝采血管采血后应立即轻摇(或颠倒)充分混匀
(4)血流变学试验、血凝试验、血糖试验、丙肝RNA试验等应在采集标本后注明采集时间立即送检
    10、记录采集病人标本的时间
    对同一病人作多次测定,最好每次在同一时间收集标本,便于比较,以减少该项目在人体内昼夜变化的影响。
另外尿液常规分析标本如超过2h即认为不新鲜标本,将作为拒收标本的依据。
 
(四)及时处理标本,及时检测
因血液中有些化学成份于离体后极易分解,使其含量改变,如影响血糖及酶类测定。时间过久,会发生细胞代谢、气体交换和物质转移。
血细胞代谢可使血糖下降,部分酶活性下降,如:AST、LDH的活性。因此标本要及时检测,尽可能当天标本当天完成。
所谓物质转移是指有些化学成份在细胞内外相差悬殊,离体时间过长,细胞内外浓度会发生变化,影响测定结果。如肌酸激酶、乳酸脱氢酶、电解质等。
血浆或血清与血细胞的分离应及时,血浆有富含或贫含血小板之分,应从离心速度和时间加以保证。
欲送外单位检测时应注意及时、保温(冷蒇或37℃)、避光、防震、防止交叉污染等措施。
表7显示标本延迟分离血浆对部分检验项目的影响。
(五)血标本应防止溶血
溶血是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素。标本溶血后,细胞内含量高的物质进入血清,造成测定结果升高;细胞内含量低的物质进入血清,则可使血清形成稀释,使测定结果降低(见表8)。同时溶血还可以干扰测定中的反应过程及比色,血红蛋白在431nm和555nm处有吸收峰,所以
如果在测定中选用此两种波长者,则可导致明显的假性吸光度增高。
1、溶血干扰机理
溶血干扰机理有三种:
(1)使得血细胞高浓度组分逸出,使测定结果增高,如钾、镁、LDH、醛缩酶等;
(2)Hb对分光光度测定中吸光度的干扰,溶血能引起可见光谱的短波长处(300nm-500nm)测定吸光度明显增高,如溶血引起重氮单试剂法胆红素测定结果明显升高。
表7 肝素锂抗凝标本延迟分离血浆的影响(室温  单位:mmol/L)
采血分离时间(h)
0
2
4
6
10
24
血浆K+
血GLU
4.1
4.2
4.2
4.0
3.9
3.9
4.3
3.6
4.8
3.0
6.4
0.9
 
表8  溶血对7种血清酶活性测定的影响
项目
不溶血血清
酶活性(U/L
酶活性增加(+)或减少(-)%*
0.8
1.7
3.4
5.0
6.6
ALT
AST
LDH
ACP
CK
ALP
r-GT
7
9
165
8
37
96
9
0
0
+58
0
+5
-7
0
0
+22
+96
+13
+8
-12
11
+11
+78
+106
+50
+22
-21
-22
+11
+100
+302
+75
+30
-28
-22
+33
+156
+365
+125
+45
-37
注:① 0.8、1.7、3.4……示血清溶血程度,以Hbg/L表示
 ② * 以不溶血血清酶活性为100%
 
(3)细胞成分对化学反应的干扰,如Hb可竞争性地抑制胆红素与重氮试剂的偶氮反应,使J-G法胆红素测定结果偏低。
  溶血多由于采血步骤不规范,技术不熟练而导致,如抽血不顺利,抽血不取下针头直接注入试管等。严重溶血标本原则上不能使用,应重新采血送检或者在报告单上注明“溶血”字样,提醒医生注意。
2、采集方法不当造成标本溶血
常见的不正确方法引起容血有以下几个方面:
(1)穿刺前由于消毒酒精未干;
(2)穿刺部位不准确,造淤血而容血;
(3)注射器漏气,产生气泡造成容血;
(4)抽血后未卸下针头,强力注入试管;
(5)长时间或用力摇动或剥动血块;
(6)采血时压迫时间过长;
(7)抗凝剂和血液的比例不适;
(8)注射器、容器内有水;
(9)全血放置时间过长。
 
(六)标本保存方法
    如需要保存的标本,必需以不影响其结果为原则,注意不同检测项目采用不同条件。如:
测定ALT、AST标本放在4℃时仅能保存3天、-20℃下可保存1个月;
LDH放在低温下要解聚使结果降低,相反放在室温中24h仍较稳定;
ALP只有先将血清酸化至pH 6.0,然后置冰葙才稳定;
CK、CK-MB最不稳定,在室温下2h后活力明显下降,不宜保存。
具体能否保存或保存条件,可详细阅读该项目试剂盒中说明书。
 
三、分析后的质量管理
 
(一)报告不规范
手写报告不规范的尤其突出,字体不端整、龙飞凤舞使人难以看懂;
一些报告缺项,如尿液分析缺一般性状检查结果或沉渣结果;
阳性、阴性书写不规范;
生化只有英文缩写而无中文名字,有的缺参考范围;
有的无检查人员或质控员签章;
有的检查日期缺年份、有的甚至没有检查日期;
计算机联网报告单好得多,但也有项目无中文对照;
找不到标本采集时间、收到和检查完成时间等。
 
(二)审查中发现报告单有问题时应及时复查或纠正
诸如漏项未查、结果之间互有矛盾、特别异常结果、前后结果相差甚远等,应及时发现,及时复查,把差错消灭在实验室之内。通过审查的报告单有时还会有漏检的报告(这是从反馈意见中获得),但这类过错为数甚少。
 
(三)异常结果未及时通知临床
按医院质控规范化要求,异常结果必须及时报告给临床值班人员,并记录下电话报告时间以及听电话人的姓名,可能由于工作繁忙,或者仪器打印出来的报告单未及时审查出来而延误报告时间。
科领导必须加强工作人员责任心的教育。
计算机联网是根本解决此问题的办法。
 
(四)急诊化验未及时告知和发出
凡属急诊化验理应优先检查,及时报告,这也是每个实验室的法规,可是当您深入蹲点调查,在未发出的报告单中必定含有数量不等的急诊报告单,这也说明检验人员法制观点不强、爱心不够的具体表现。
 
(五)门诊未发出报告单
住院部未及时发出的报告单或发错病室的报告单不多(计算机联网时会更少),一般均能及时纠正。
门诊报告单没能及时发出的则占相当大的比例,如果我们以一周后未取的报告单作统计,约占门诊全部报告单的10%左右,无论对病人或者检验人员都是最大的浪费。
我们应该好好研究如何解决的方案,诸如采取缩短检验周期做到立等可取、开展邮寄业务(让病人事先把地址留下,一旦超过一定时间不来自取的就邮寄)等措施,使这类“死”报告降至最低甚至消灭。
 
(六)与临床沟通不够,没有做到定时向临床征求意见
当今医院都十分强调以病人为中心,所以加强临床医学与实验医学沟通十分重要,让临床了解我们,让我们了解临床都是十分必要求的,在沟通过程中虚心听取各方面的意见,对改进我们的工作非常有用。可采用定期的联席会和不定期的走访。
 
(七)全面开展咨询工作不够,更没有向病人面对面的对话和宣传
临床实验室开展的检验项目要尽可能满足临床须要;而且要及时、准确地提供检验信息;还要全方位地提供咨询服务,这是WHO对临床实验室的要求。根据已开展这项工作的单位经验介绍,开展全面咨询工作,既可达到学科间交流、相互学习又容易同临床医护之间产生共同语言,使检验医学、临床医学结合得更好。
为门诊病人开展咨询工作,在咨询中用实验医学观点向病人正确分折检验结果,还可向病人作适当的卫生预防知识宣传,深受门诊病人的欢迎。
 
四、部分分析前质量保证措施举例
 
(一)血气分析前的质量控制
1、标本必须是动脉或动脉化毛细管标本
只有动脉血能真实反映血液中的氧化作用和酸碱状态。评价器官的氧化作用,必须分析流向细胞的动脉血,来自细胞的末梢静脉的PO2,不能提供有关O2传递的信息。
动脉血关键的优点是它从主动脉到末梢循环都是均一的,在一个病人的肱骨、桡骨和股骨同时取样,测定PH、PO2、PCO2、SO2%的结果是相同的。
2、病人采血时的状态
PH、PCO2、PO2、SO2%都是不稳定参数,它们易受病人的状态变化而改变,下列状态是必须限制的:
(1)病人的忧虑:要在心理上解决病人的忧虑,避免使用“动脉穿刺”,用各种方法使病人感到舒适,避免产生忧虑。由于害怕取样,有些病人呼吸急促,使PO2、PH增加,PCO2减少;另一些病人瞬间憋气,引起PO2、PH减少,PCO2增加。
(2)病人的体位:在采血时病人必须处于稳定状态,以不卧床病人为例,取样前至少应躺3-5分钟。
(3)辅助或人工呼吸:要评价病人辅助给氧或人工呼吸效果,至少要在此状态20分钟以上。
3、抗凝剂
用肝素锂已逐渐取代肝素钠。肝素锂的优点是:锂的含量(3.5-4.5%)比钠(9.5-12.5%)少,因此减少了血中微纤维形成的可能,还排除了同一样本测定钠时的干扰。
 
(二)哪些因素对血脂有影响
1、血脂结果的影响因素
(1)生物学因素:个体、性别、年龄和种族等。
  (2)行为因素:饮食、肥胖、吸烟、紧张、饮酒、饮咖啡和锻炼等。
(3)临床因素:内分泌或代谢性疾病、肾脏疾病、肝脏疾病、急性或暂时性疾病等疾病因素;
(4)抗高血压药、免疫抑制剂和性激素等药物因素。
  (5)标本因素:禁食状态、血液浓缩情况、抗凝剂与防腐剂、毛细血管与静脉血、标本贮存等。
2、查血脂为何要禁食12~14小时
饮食中的脂肪以甘油三酯的形式存在,被机体吸收后呈乳糜微粒循环于血中,餐后大约12小时后从血中消除,血中甘油三酯恢复至原有水平。因此,血脂检查要在禁食12~14小时后抽血。比如说,早上8点抽血,前一天晚上6点以后就不能再进食(包括零食),可少量饮水。
 
(三)临床免疫学检验标本采集要求
1、务必避免溶血,溶血对很多项目的检测都有影响。
2、ELISA方法实验不可使用叠氮钠防腐标本,因叠氮钠会影响标记酶活性。
3、免疫浊度分析实验应特别避免脂血
4、由于多数仪器采用标本管直接上机,为保证仪器液面感应的准确性,在保证结果一致性的前提下,尽量使用抗凝血。
 
(四)临床基因扩增检验标本采集注意事项
1、血液标本
目前可检测的试验项目有:乙肝病毒DNA(HBV),丙肝病毒RNA(HCV),鼻咽癌病毒(EB)、巨细胞病毒(CMV),柯萨奇病毒(COV)。
标本采集:
(1)HBV检测取血液2-3ml(红色头采血管)送检,标本严禁溶血(因血红蛋白对Taq DNA酶有强抑制作用);
(2)HCV检测,取2-3ml EDTA抗凝全血标本(紫色头采血管);
(3)EB、CMV、COV取2-3ml枸掾酸钠抗凝全血标本(紫色头采血管)。
以上(2)、(3),抗凝全血不可使用肝素抗凝剂(绿色头采血管),因肝素对PCR扩增有抑制作用。
2、痰标本
目前可检测的试验项目有:结核杆菌(TB),肺炎支原体(MP),柯萨奇病毒(COV)。
标本采集:清洁口腔后,咳取深部晨痰,盛于无菌杯中送检。
3、咽拭子
目前可检测的试验项目有:肺炎支原体(MP),柯萨奇病毒(COV)。
标本采集:取咽喉部分泌物,放入盛有生理盐水的无菌试管中(灰色头试管),要求放入标本后生理盐水有明显浑浊。
4、棉拭子
目前可检测的试验项目有:沙眼衣原体(CT),解脲支原体(UU),淋球菌(NG),乳头状瘤病毒(HPV),单纯疱疹病毒I型(HSV I),单纯疱疹病毒II型(HSV II),鼻咽癌病毒(EB),巨细胞病毒(CMV)。
标本采集:用无菌棉签取阴道分泌物,尿道口分泌物,创面分泌物或脓液等,放入盛有生理盐水的无菌小管送检。
5、尿液
目前可检测的试验项目有:结核杆菌(TB)。
标本采集:清洁尿道口后,取清洁晨尿送检。
6、前列腺液
目前可检测的试验项目有:沙眼衣原体(CT),解脲支原体(UU),淋球菌(NG),乳头状瘤病毒(HPV),单纯疱疹病毒II型(HSVII),结核杆菌(TB)。
标本采集:取前列腺液盛于无菌小管送检。
7、胸水、腹水、脑脊液等穿刺液
目前可检测的试验项目有:
胸腹水标本 — 结核杆菌(TB)。
脑脊液标本 — 单纯疱疹病毒I型(HSV I),鼻咽癌病毒(EB),巨细胞病毒(CMV),柯萨奇病毒(COV)。
标本采集:取穿刺液1ml盛于无菌瓶或无菌小管送检。
   
(五)临床微生物检验标本采集注意事项
1、正确采集标本首先应注意:
(1)在未使用抗生素之前取标本;
(2)做好消毒灭菌,严防标本被体表和空气中的细菌污染;
(3)标本采集后及时送检。
2、血培养注意事项
(1)血培养最好同时做需氧和厌氧培养,提高病原菌检出率;
(2)对一些重症感染病人做多次血培养,提高病原菌检出率;
(3)采血量务必在10ml以上。
3、痰、咽拭子标本采集注意事项
(1)痰、咽拭子标本需先漱口后再用温开水漱口,然后取标本;
(2)痰标本应咳深部痰。
4、尿液标本采集注意事项:清洁尿道口后,取清洁中段尿送检。
5、所有采集标本均应放入无菌密闭的样本杯或无菌瓶送检。
6、对于厌氧培养标本,需预先通知微生物实验室作好准备。
 
(六)浆膜腔液检查
穿刺在无菌条件下进行,分别装在两个无菌容器内。为避免凝块形成,细胞发生变形,破坏而影响结果,可与其中一容器内加入106mmol/L枸橼酸钠抗凝剂,标本与抗凝剂比例为10:1,该标本用于细胞计数和分类等,另一容器不加抗凝剂,用于观察凝集状态和生化检验等。
 
(七)尿液标本的采集要求
尿液常规检测推荐留取早上第二次标本:第一次尿液标本在膀胱中存积太久,细胞等有形成份可能发生退化,影响尿液沉渣分析结果的可靠性;第二次尿液标本的留取时间可能更接近检验科上班时间,避免标本采集后存放太久。
 
(八)病人自己留取标本时应注意那些问题
    在实验的一些标本中,有些标本是需要病人自己留取的(尤其是门诊病人)。如尿液、痰液、精液和粪便的检查,不合适的留取或污染会导致假阳性或假阴性结果的发生,从而导致误诊、误治。
1、标本留取量:尿液标本的留取要注意留取时间和留取量,主要取决于检查项目的要求,有些是12小时或是24小时等定时留取的,有时需要记录总量的,但切记如果计时前的尿排空弃去,那么最后一次尿必须全部排空保留,计入总量中。一定要精确记录总量,避免因此引起误差。
2、标本污染:一般污染有以下几种情况:
(1)未使用指定的专门容器,使留取的标本被容器内的原有的真菌、细菌污染,或用装药品的容器,如用装过含糖胶囊的容器留取尿液检测尿糖,导致假阳性的发生,没有任何理由判断或猜测未经洗涤或洗涤不彻底的药瓶不会干扰检验结果。
(2)未按无菌操作留取标本的,导致标本污染。
(3)尿液与分泌物、粪便与经血的交叉污染是最常发生的。比如,女性未清洗外阴,尿液里可见的白细胞若无临床症状就可能是白带污染,也可以在尿液里查见真菌,有时服用大量抗真菌药无明显好转,即为污染所致。
(4)痰液被唾液或鼻液分泌物所污染。质料表明,目前实验室痰液标本的不合格率达40%。
(5)饮水或饮料过多稀释尿标本,或因饮料所含成份而干扰测定结果(如蛋白、激素、维生素C等测定),也可以降低检测项目的浓度而出现假阴性.
3、标本保存送检:标本不能及时送检或需留取较长时间的标本(如精液常规检查的留取,留取时间过长,影响精子的活动力和活动率),不加适宜防腐剂,会导致结果变异等,如24小时尿糖测定,尿液在炎热的气温下会被细菌分解,导致结果明显偏低.冰箱保存是较好的的办法,但有些成分会沉淀析出,影响其化学成分的测定,血培养在放入培养箱之前,如果放入冰箱会导致细菌死亡,碱性尿液的细胞管形,即使在冰箱保存也会被破坏。
 
(九)病人在取标本前应做的准备有以下几项:
1、饮食:一般的血标本应禁食8-12小时,但不应该超过16小时,饥饿状态太久对某些指标的检测是有影响的,如胆红素、血浆蛋白、血脂和内分泌激素等。同时应该平衡饮食一周,以增加因为短暂的饮食引起的营养过剩而影响结果。检查粪便潜血,留取标本前3天禁食肉类、肝、血等动物食物和大量绿色蔬菜以及维生素C和含铁剂的药物。
2、禁烟、酒和刺激性的饮料:一般要求在留取标本前3天禁大量饮酒或其他刺激物质。
3、避免剧烈运动:高强度的运动可使肌酸激酶升高达3周以上。匆忙到门诊抽血的病人,应休息15分钟,以稳定血压、情绪,避免紧张、恐慌。
4、非抢救病人,取样前应停服一切药物,不能停服药物者,应在申请单有关项目中加以说明。比如细菌培养加药敏的检测,就因为服药而影响阳性检出率,耽误临床治疗最佳时间。
5、遵照医嘱,对一些特殊的检查项目,应尽早做准备,比如精液常规的检查等。了解标本留取中的注意事项,比如什么是中段尿等。
 
(十)门急诊检验标本要求:
1、尿液检验:一般以清晨第一次尿为好,门诊患者,可临时排尿作检查,用清洁容器或用一次性尿杯留取100ML及时送检。(一次尿杯检验科有备)
2、如需检验24小时混合尿,应将历次所排之尿液放入清洁容器内,混匀后记录总量,取100-200ML送检。为防止尿液腐坏,可放置冰箱或加适当防腐剂。(每100ML尿内放40%的甲醛0.5ML)
3、粪便的收集:门诊患者,以临时采集标本为原则,选择带粘液脓血等病理部分,如无粘液或脓血,可采粪便表面不同部位采取。送检粪便量约5克或指头大粪便一块,可用不透水的纸合为容器。
4、阿米巴及其他原虫滋养体检查,除标本必需新鲜,还必需要注意保温,并立即送检。
5、精液检验:将精液排于清洁干燥小瓶内,不宜将精液储于避孕套内。留取后30分钟内送检。(天气冷注意保温)
6、血液生化标本:应在空腹采取。但血脂和血糖测定一定要求空腹12小时以上。
 
五、方法学对检验质量的影响
 
最近几年检测方法学有了很大进步,酶、单抗等技术的应用使检测反应温和、快速、特异,但仍有一些项目的检测方法受多种因素影响。如:
(1)尿液干化学检测
① 蛋白质膜块只对白蛋白敏感,对球蛋白不敏感,对本周蛋白不反应。
② 葡萄糖膜块只对葡萄糖产生反应,对乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反应。
③ 酮体膜块对乙酰乙酸最敏感、丙酮次之,对β-羟丁酸不反应。
④ 隐血膜块不但对完整和破损RBC均有反应,而且对游离Hb也反应。
⑤ 白细胞膜块只对中性粒细胞有反应,而对淋巴细胞无反应。
⑥ 胆红素及尿胆原膜块灵敏度比Harrison手工法低得多。
⑦ 比重膜块只能反映尿中阳离子多少与比重计结果不一,对婴儿等低比重尿则不敏感。
(2)氧化酶法检测血中葡萄糖
当患者服用VitC,谷胱甘肽、10mg/d1左旋多巴可引起检测结果的负偏差(降低)。
(3)试剂质量问题。
(4)血清分离不好,使仪器加样针轻微堵塞,导致结果偏低。
(5)临床检测都是一次检测的结果报告,而不是几次测定结果的平常值,有一些不可预料的因素可使部分结果产生变异。
 
六、生物学变异实例
 
这类变异可能由某些固有条件所致(见表2、表3),例如:性别、生理、病理过程或环境影响。年龄、周期性变化(如月经、昼夜变化)、妊娠是重要的生理变化,亦增加了生物变异的复杂性。饮食、水或脱水、体育活动或锻炼又是其它重要因素。在血样采集前后的病人身体姿势是相当重要的,病人在站立时较卧床时血液内具有较高的分析物浓度。如能减少生物变异因素,一些检验项目的使用价值将随之提高。
部分常规检验项目的生物学变异:
1、谷草转氨酶(AST):
(1)升高:4-14岁儿童约升高30%;安妥明型低脂蛋白血症约升高20%,慢性饮酒约升高20%;轻度溶血约升高10%。   
    男性:长期剧烈运动约升高75%;20-30岁超负荷约升高15%;100公斤体重较50公斤者约升高10%;40-50岁年龄约升高10%;50-60约升高10%。
    女性:50-60岁年龄约升高15%;20-30岁超负荷约升高10%。
    (2)降低:VitB6缺乏约降低30%。
2、谷丙转氨酶(ALT):
(1)升高:100公斤体重的男性较50公斤者约升高85%;20-30岁超负荷的男性约升高60%;剧烈而长期运动的男性约升高30%;100公斤体重的女性较40公斤者约升高35%;20-30岁超负荷女性约升高10%;慢性饮酒约升高30%;40-60岁约升高20%;安妥明型低脂蛋白血症约升高20%;站立较卧姿约升高10%。
(2)降低:4-14岁年龄约降低10%;VitB6缺乏者约降低40%。
3、乳酸脱氢酶(LDA):
    (1)升高:8-9岁儿童约升高50%;12-13岁儿童约升高30%;在女性,50-60岁年龄约升高20%;80公斤体重较40公斤者约升高7%;在男性,剧烈而长期运动约升高40%,中强度的锻炼约升高15%;社会职业范畴农民较高级职员约升高15%。
    (2)降低:口服避孕药约降低6%。
4、肌酸激酶(CK):
    血清中CK男性高于女性;1岁以上儿童含量与成人相同;1月内的婴儿为正常成人的2-5倍;肌肉发达者CK活力较高;黑人的CK高于白人。CK在骨骼肌、心肌和脑组织中有很高含量。
5、碱性磷酶(ALP):
    由于骨ALP同工酶活力高而致总ALP升高见于儿童;9-14岁女孩约升高500%;13-15岁男孩约升高450%;6-9岁儿童约升高350%;妊娠致胎盘ALP活力增加(妊娠9个月和分娩后)引起总ALP约升高250%;绝经约升高25%;50-60岁男性约升高10%;O型和B型血较A型约升高10%;超负荷的女性约升高10%;饭后可升高5%-20%,系小肠ALP同工酶升高所引起的。
    口服避孕药约降低10%;女性安妥明型低脂蛋白血症约降低10%;男性安妥明型低脂蛋白血症约降低25%;均系影响肝ALP同工酶活力而致总ALP活性降低的。
6、γ-谷氨酰转酞酶(GGT):
20-30岁超负荷的男性约升高58%;50-60岁男、女性均约升高30%;慢性酒精中毒约升高20%-40%;女性90公斤体重较40公斤者约升高42%;4-10岁的儿童约降低10%。
7、淀粉酶(AMY):
许多药物可引起淀粉酶活力的升高:如碘化钾、强的松、皮下注射组织胺、促肾上腺皮质激素等,枸橼酸盐和草酸盐可抑制淀粉酶活性,故不宜用作该检测项目的抗凝剂。
8、胆碱酯酶(CHE):
在男性,长期负重约升高25%;120公斤体重较60公斤者约升高14%;在女性,饮酒约升高20%;长期负重约升高18%;100公斤体重较50公斤者约升高18%;剧烈运动可致升高。
在女性,口服避孕药约降低10%;青春期可降低14%;25-40岁约降低20%,妊娠降低25%-30%。
9、总蛋白(TP):
(1)升高:新生儿约升高10%;连续用力约升高10%;站立较卧躺高约10%;夏委较冬季升高约8%;适度用力升高约3%。
(2)降低:口服避孕药的女性约降低2%;60-80岁的老年人约降低3%;6-7岁的儿童降低5%;4-150天的婴儿约降低10%;妊娠妇女约降低10%。
10、白蛋白(AID):
(1)升高:出生婴儿约升高20%,持久用力约升高10%,直立较卧姿升高约10%。夏季较冬季升高约4%,中度用力约升高3%;应用压脉带取血约升高3%。
(2)降低:吸烟可使白蛋白降低3%;慢性摄入乙醇约降低5%;60-80岁老人约降低8%,服用抗癫痫药物降低8%,4-150天的新生儿约降低20%,妊娠降低25%。
11、总胆红质(TBIL):
从出生至2天的足月新生儿约升高400%;从第2天至满月逐渐减少至正常;禁食者约升高20%;妊娠约升高10%。
12、尿素氮(BUN):
(1)升高:大量白蛋白饮食约升高30%;50-60岁的女性约升高30%;而男性约升高15%,农民较自由职业者约升高10%;40-50岁的人约升高10%;季节变异约升高5%(夏季)。
(2)降低:酗酒约降约5%;吸烟约降低10%;3期妊娠约降低10%;4-10岁儿童约降低12%。
13、肌酐(CR):
大运动量的男子约升高20%;不分性别、季节律(夏季)约升高6%。昼夜律(夜间)升高5%;55-60老年人约升高5%。
4-10岁儿童约降低30%;妊娠约降低6%。
14、尿酸(UA):
(1)升高:长期瘦肉饮食约升高150%,遗传学上的大洋洲人约升高 30%,饮酒、富含嘌吟类饮食约升高10%-30%,精神紧张约升高5%;超载负荷约升高15%;绝经约升高10%。
(2)降低:低嘌呤饮食15%;14-20岁降的男性约降低6%;4-14岁的男孩约降低30%;4-10岁的女孩约降低5%;口服避孕药约降低5%;A型较AB型女性约降低12%。妊娠约降低12%。
15、粘蛋白(MUCOSIN):
(1)升高:60-80岁的老人约升高50%;肥胖妇女约升高26%;月经周期约升高14%;男性约升高15%,锻炼约升高12%。
(2)降低;妊娠约降低20%-30%口服避孕药约降低21%-36%,新生儿约降低70%-75%,早产儿约降低70%-95%。
16、铜蓝蛋白(CEP):
新生儿由于肝脏功能发育不完善,合成铜蓝蛋白的能力有限,处于较低水平,出生后3-6个月可达正常人浓度。妇女妊娠期,由于血清铜增多,血浆铜蓝蛋白明显升高。
17、铁蛋白(FERRITIN)
测定值与年龄性别有关;绝经期前妇女和16以下儿童较低;男性明显高于女性。
18、免疫球蛋白(IGA):
(1)升高:黑色人种约升高20%-75%;60-80岁老人约升高15%- 60%,锻炼约升高14%;冬季较夏季约升高10%-14%,肥胖女性约升高30%;男性约升高4%-30%。
(2)降低:新生儿显著降降低达98%-100%;3-5岁儿童约降低50%;口服避孕药约降低11%-40%。妊娠降低20%。
19、三酸甘油酯(TG):
(1)升高:妊娠约升高50%;餐后可升高20%-100%;平均升高50%;口服避孕药约升高40%;富含饱合脂肪酸的饮食约升高35%;50-60岁的人约高30%;吸烟约高20%;长期饮酒约高15%,超载负荷升高约50%。
(2)降低:激烈活动可降低15%;新生儿约降低50%。
20、总胆固醇(TC):
妊娠期的第7-9个月约升高45%;40-50岁的女性约升高10%;绝经期约升高10%;不分性别慢性饮酒约升高10%;富含饱合脂肪酸的饮食约升高6%;长期负重约升高4%;吸烟者约升高4%。
B型血的人较O型血的人约低5%;素食者约低5%;锻炼可降低5%;月经周期的黄体期可降低20%;新生儿约降低50%。
21、载脂蛋白AI(APOAI):
(1)升高:用抗癫痫药约升高20%;饮酒升高约20%;低血脂症升高约15%;口服避孕药约升高10%;绝经约升高4%;用雌激素升高3%。
(2)降低:用促黄体生成素约降低3%
22、载脂蛋白B(APOB):
20-60岁约升高20%,肥胖升高,在女性用促黄体生成素可升高19%左右。
运动降低约2%;素食降低约2%;低血脂症可减低10%左右;在女性用雌激素约降低6%(亦有人报道降低30%);许多治疗药物如:安妥明、烟酸、右旋甲状腺素等均可导致APOB的降低。
23、游离脂肪酸(NEFA):
饥饿导致NEFA增加;进食后使用NEFA减少;消化吸收后,人体的50%-90%热能需要量由血浆中循环的NEFA供给,正常人体以这种方式每小时周转的脂肪酸量高达25克。
24、钾(K)
男性食入水果过多约升高30%。用压脉带取血约升高12%;溶血导致假升高;中等强度锻炼约可降低8%。
25、钠(Na):
高钠饮食约升高15%,昼夜律变异中约升高3%,最高值在11时;长期低钠饮食约降低5%。
26、钙(Ca)
固定不动约升高10%;站立比躺下约高5%,用压脉带约升高5%。
在女性,口服避孕药约降低4%;妊娠约降低5%;哺乳约降低5%。
27、磷(P):
(1)升高:4-10岁男孩约升高30%;男性少量饮食后取血约升高15%;男性轻度运动约升高7%;绝经约升高10%。
(2)降低:65-80岁男性约降低5%;超载负荷的男性约降低5%;青春期的男性和女性约降低8%;芳香族有机溶剂中毒约降低12%;口服避孕药物降低15%。
28、铁(Fe):
女性比男性低10%-15%;2岁以下儿童测定值小于1000ug/l;2岁以后,血清铁测定值可达成人水平,且血清铁存在着日内变异,呈昼夜周期性变化,晨6点左右最高,以后逐渐降低,晚9-10点达最低水平。如改变成有规律的白天睡眠、夜间工作,则曲线相反;孕妇血清铁降低。
29、铜(Cu):
女性高于男性;清晨高,晚间低;饮用大量牛奶后血清铜降低;孕妇血清铜显著增加;新生儿水平较低,3-10岁开始升高。
30、发锌
发锌含量与年龄有关,新生儿含量最高,可达318ug/g,数月内徙降,1-6岁维持较低水平,7岁后又随年龄而渐增,11岁后可达成人水平,50岁以后发锌减少;发锌含量与性别及发色关系不大。

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原始作者: 不详 录入时间: 2005-12-13 09:30:56
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