风湿病学所研究的对象是风湿性疾病(Rheunatic diseases),包括所有原因引起的骨关节疾病。主要包括下列9种疾病:
1、 类风湿关节炎(RA):是一种伴急性发作的慢性、多发性关节病变的全身性自身免疫性疾病。以对称性、进行性和破坏性关节病变以及血清中存在高滴度的类风湿因子为主要特征。
检测:
A、 RF乳胶凝集实验:滴度≧1:32时对诊断RA有意义。
80%的RA患者RF阳性,滴度大于1:64。
试剂:BioSystems公司 RF乳胶试剂盒,150T/kit,
B、 抗角蛋白抗体(AKA):AKA对RA诊断的特异性较强,在RA的早期、甚至在临床症状出现之前RA患者即可检出AKA。因此AKA可作为RA早期诊断指针之一。
试剂:BioSystems公司:AKA检测IFA试剂盒 48t/kit
C、 抗核周因子(APF):
注: 目前有观点认为AKA和抗核周因子(APF,antiperinuclear factory)是同一种自身抗体,依据是角蛋白和核周因子这两种抗原均定位于相似的鳞状上皮层;AKA阳性的患者血清均同时存在APF,有很高的相关性;AKA和APF分别与中性或酸性丝状素(filaggrin)免疫吸附后对各自的抗原底物失去了反应性。这些结果显示AKA和APF有相同的抗丝状素特性,因此建议将AKA和APF命名为抗丝状素抗体(antifilaggrin antibody,AFA)
2、 系统性红斑狼疮(SLE):红斑狼疮(LE)是一种病谱性疾病,病谱的一端为盘状红斑狼疮(DLE),病变的另一端为系统性红斑狼疮(SLE),病变累及多系统、多脏器,并伴有多种自身抗体。在临床上最多见的是SLE。多见于育龄期妇女,女性与男性之比为10:1
检测:
A、 抗核抗体(ANA)
a、 ANA IFA检测:首选Hep-2,原因:Hep-2抗原片敏感性较高,荧光图谱较典型、全面。
试剂:SCIMEDX公司 ANA(Hep-2) IFA检测试剂盒 300t+50t/kit
BioSystems公司 ANA(Hep-2) IFA检测试剂盒 120t/kit
b、 抗DNA抗体检测: SLE标记性抗体
试剂:1)BioSystems公司 dsDNA IFA kit(短膜虫) 100t/kit
2)SCIMEDX公司 dsDNA ELISA kit(定量) 96t/kit
3)dsDNA 金标法 kit 40t/kit
c、 可提取性核抗原(ENA)抗体:
试剂:1)SCIMEDX公司 ENA Screening Kit、ENA Profile Kit 、Sm kit、Sm/RNP kit、SSA(Ro) kit、SSB(La) kit 、Scl-70 kit、Jo-1 kit ELISA、
3、 硬皮病(Sclerderma):是以皮肤进行性水肿、硬化,最后发生萎缩为特征的结缔组织病。一般呈慢性经过,女性发病率高。
试剂:
A、SCIMEDX公司 Scl-70 kit ELISA 96t/kit
注:Scl-70抗体是硬皮病的标记抗体。
B、抗着丝点抗体(Anti-centromere antibody,ACA):检测方法是以Hep-2为底物,通过IFA检测,阳性者在非分裂期细胞内可见核质内为数不多的散在荧光染色斑点。在有丝分裂期细胞的染色体区呈密集的荧光颗粒。
约80%以上的CREST患者ACA阳性,对诊断CREST综合症具有很高的价值。
C、抗核仁抗体:检测方法是以Hep-2为底物,通过IFA检测,阳性者在核内呈块状荧光,与核内数目一致。核仁型抗核抗体中有多种成分,既有抗核仁抗体,也有抗Scl-70抗体等等。
抗核仁抗体阳性者多伴有抗Scl-70抗体。
D、抗线粒体抗体:SCIMEDX公司 IFA kit,阳性者在肾小球周围的肾曲管上皮细胞胞质呈亮绿色荧光。25%的系统性硬皮病患者有线粒体抗体,在所有抗线粒体抗体阳性的系统性硬皮病患者中,约有79%为CREST综合症。
4、 皮肌炎(DM)和多发性肌炎(PM):DM表现为皮肤和肌肉的弥漫性炎症,皮肤出现红斑、水肿,肌肉表现为无力、疼痛及肿胀,可伴有关节痛和肺、心肌等多脏器损害。DM发病率大于PM。
试剂:
A、抗Jo-1抗体(又称PL-1抗体)SCIMEDX公司 kit ELISA 96t/kit
注:Jo-1是PM和DM,尤其是PM的标记性抗体。抗Jo-1抗体阳性者多伴有间质性肺病变,部分患者的肺部病变可远重于重于肌肉。
B、抗Mi-2抗体:检测方法是以Hep-2为底物,通过IFA检测,阳性者处于分裂细胞的细胞核呈稠密的斑点状荧光染色。
注:此抗体的出现说明患者对治疗反应好。
C、抗PL-7和PL-12抗体:检测方法是以Hep-2为底物,通过IFA检测,PL-7阳性者在细胞质内出现斑点状荧光染色;PL-12阳性者在细胞质内出现稠密、浓集的斑点状荧光染色。
D、抗PM-Scl抗体(又称PM-1抗体):检测方法是以Hep-2为底物,通过IFA检测,阳性者核质呈弱荧光染色,而核仁呈均匀的强荧光染色;与此同时正在分裂的细胞的染色体呈荧光染色阴性。
PM-Scl抗体最多出现于PM和DM的重叠综合症(OLS)患者,阳性率约24%,也可单独出现于PM患者。
E、抗Ku抗体(又称p70/p80抗体):检测方法是以Hep-2为底物,通过IFA检测,阳性者细胞核和核仁呈斑状的均质型荧光。
抗Ku抗体在OLS患者中的阳性率为26%,而特异性为99%,也称OLS的"标志抗体"。
5、 混合性结缔组织病(MCTD):具有SLE、PM、PSS以及RA的部分症状,又不能以任何一种疾病来解释的结缔组织病。
试剂:
A、SCIMEDX公司RNP kit ELISA 96t/kit
注:在MCTD患者中,RNP抗体阳性率大于95%,认为RNP是MCTD重要的血清学指标。
B、 IFA 检测:MCTD患者呈斑点型,且无论是疾病的活动期还是缓解期始终处于高滴度状态。(注:此点不同于SLE患者的抗Sm以及ANA等抗体均可随病情好转而转阴性或滴度降低。)
C、抗Sm抗体和dsDNA抗体:绝大多数MCTD患者此两种抗体为阴性。
6、 干燥综合症(SS):是一种侵犯外分泌腺体,尤以唾液腺和泪腺为主的慢性自身免疫性疾病。
试剂:
A、SCIMEDX SS-A kit ELISA 96t/kit
B、SCIMEDX SS-B kit ELISA 96t/kit
注:在SS患者中抗SS-A和SS-B抗体更多地出现在伴有内脏损害者。
C、ANA(Hep-2)IFA 检测呈阳性。
注:SS患者的抗SS-A和SS-B抗体阳性率≧ANA。在IFA方法检测ANA中抗SS-A、抗SS-B抗体的亮度很弱,尤其是SS-A,所以出现抗SS-A、抗SS-B抗体阳性而ANA却阴性。
D、RF IgM:可在50%的SS的患者中出现,其滴度较RA低。
E、免疫循环复合物(CIC):CIC在伴有系统损害的患者中可呈阳性,无系统损害者呈阴性。
7、 抗磷脂抗体综合症(Antiphospholipid syndrome,APS):特点是反复的动脉、静脉血栓,习惯性流产及血小板减少等症状。
试剂:
A、 抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,aCL):SCIMEDX公司aCL IgG/IgM Combi ELISA kit 进行定量和半定量检测。
注:第二界国际标准化讨论会提出用GPL(IgG-aCL),MPL(IgM-aCL)为定量单位。
B、 抗beta2糖蛋白-1(beta2GP-1):有称载脂蛋白H(apo H)
注:目前认为:抗磷脂抗体所针对的靶抗原就是beta2GP-1抗体或beta2GP-1-磷脂复合物。
目前临床上常规诊断APS的免疫学检测是抗心磷脂抗体(aCL)(已标准化)。常规aCL-ELISA所检测的抗体包括三部分:1)直接与心磷脂结合的抗体,与感染有关,称为"不依赖于beta2GP-1的aCL";2)针对beta2GP-1的抗体,称为"beta2GP-1依赖性aCL";3)aCL还可识别其他与磷脂结合的血浆蛋白,如凝血酶原、蛋白S、蛋白C等。
8、 韦格纳肉芽肿(WG):基本病变是坏死性肉芽肿和血管炎,病变累及小动脉、静脉及毛细血管,系多系统疾病,常被累及的有鼻和副鼻窦、肺、肾及皮肤等器官。
试剂:
A、 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)
方法1:间接免疫荧光法(IFA),SCIMEDX公司 ANCA kit,可分为三种类型:
i. 胞质型ANCA(cANCA):所识别的抗原为蛋白酶3(PR3);阳性者,中性粒细胞胞质呈黄绿色粗颗粒状荧光,而细胞核不被染色。
注:cANCA是诊断WG的标记性抗体,WG患者经治疗后随着临床症状的消失cANCA可转为阴性,因此,cANCA既可作为诊断又可作为监测WG的指标。
ii. 核周型ANCA(pANCA):所识别的抗原为髓过氧化物酶(MPO);阳性者,中性粒细胞核周围呈均匀的黄绿色荧光,而细胞核不被染色。
注:pANCA多见于嗜酸性肉芽肿性血管炎(CSS),阳性率75%;慢性自身免疫性肝病,阳性率80%;伴有血管炎的肾小球肾炎、结节性动脉炎。这些疾病的活动与否和疗效与pANCA的滴度密切相关。
iii. 非典型ANCA(aANCA):所识别的抗原是组织蛋白酶G(cathepsin-G)。
注:aANCA可在溃疡性结肠炎、克罗恩病(Crohn disease)、原发性硬化性胆管炎中被检测到。
方法2:SCIMEDX公司 ANCA ELISA 分型检测试剂盒 96t/kit
a、PR3 (cANCA) ELISA 96t/kit b、MPO(pANCA) ELISA 96t/kit
注:肾脏症状主要须与狼疮性肾炎和肺出血性肾炎综合症(Goodpastyre syndrom)相鉴别。狼疮性肾炎患者可检测到抗Sm抗体和dsDNA抗体;肺出血性肾炎综合症患者的血清中可检测到抗肾小球基底膜抗体(GBM)。
9. 酸性肉芽肿性血管炎(CSS):又称变应性肉芽肿性血管炎。主要累及中小动脉的系统性坏死性血管炎,其特征为受累组织有大量嗜酸粒细胞浸润和血管外肉芽肿形成。患者多有外周血嗜酸粒细胞增多,哮喘或过敏性鼻炎。
试剂:
b) pANCA检测:方法同原理见上述。
注:大多数的CSS患者在活动期时pANCA为阳性,在疾病缓解后转阴。PANCA即可作为诊断又可作为监测CSS的指标。
c) 血清IgE: ELISA 方法检测
注:血清IgE在血管炎期升高也是CSS的特征之一,随病情缓解而下降,血管炎反复发作时IgE可持续增高。



