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火箭电泳试验


[ 来源:本站 | 作者:陈雪礼 | 时间:2005-11-6 12:25:21 | 浏览: ]

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火箭电泳试验

火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为:在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。

材料:

1.诊断血清(抗体):抗人IgG或IgA免疫血清

2.待检血清(抗原):人血清

3.参考血清

4.pH8.6,离子强度0.05M巴比妥缓冲液配制(见对流免疫电泳试验)

5.其它:琼脂粉,微量进样器,打孔器,玻璃板,电泳仪

方法:

1.抗体琼脂板的制备

同单向扩散法,但注意稀释液应用pH8.6离子强度0.05M的巴比妥缓冲液。

2.打孔见下图

图7 火箭电泳抗原孔位置图

3.将用缓冲液稀释的适宜浓度的参考血清及适当稀释的抗原(人血清)分别加入各孔中,每孔10或20微升,要求加量准确而不外溢。

4.把加完样的免疫琼脂板放入电泳槽中进行电泳,电压4—6伏/厘米,电泳时间1—5小时,直到大部分抗原孔前端出现顶端尖窄而完全闭合的火箭状沉淀线,关闭电源。

5.取下琼脂板,以抗原孔中心为起点,量出各火箭状沉淀线的高度。同单向琼脂扩散法绘制标准曲线,查出待检血清中Ig含量。


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原始作者: 陈雪礼 录入时间: 2005-11-6 12:25:21
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