陈雪礼¹⁾  陈越¹⁾ 刘晓峰¹⁾  史国香²⁾   黄震¹⁾

(¹⁾九江市第一人民医院检验科，九江332000  ²⁾广东中山大学达安基因诊断中心)

 

【摘要】目的 调查CT、UU、NG、HPV等性病的流行病学状况；方法 对江西省12家市级医院性病门诊就诊的16450例泌尿生殖道感染患者留取的分泌物采用荧光定量PCR方法检测CT、UU、NG、HPV-DNA结果；结果 12733例男性标本中CT、UU、NG、HPV阳性率分别为16.4%、9.1%、7.1% 、6.5%；3717例女性标本中CT、UU、NG、HPV阳性率分别为22.0%、21.1%、10.5%、2.1%。CT+UU混合阳性检出率6.3%；CT+NG混合阳性检出率为0.6%；CT+HPV混合阳性检出率为1.4%；UU+NG混合阳性检出率为3.4%；UU+HPV混合阳性检出率为3.7%；NG+HPV混合阳性检出率为0.7%；两种以上混合感染例数的阳性检出率为1.0%。2002、2003年阳性检出率分别为37.1%、48.5%。     结论  江西省CT、UU、NG、HPV4种性病病原体的流行较为严重，总阳性检出率为42.8%，且有逐年增长的趋势。

【关键词】 性传播疾病  沙眼衣原体 解脲支原体 淋球菌 人乳头瘤病毒  流行病学  FQ-PCR

 

The clinical laboratory in the first people hospital in Jiujiang City,(Jiujiang   332000)

 

   ABSTRACT  Obijective:Knowing about epidemiology state about pathogens of the STD,such as CT、UU、NG、and HPV,etc in Jingxi province.Method:By use of FQ-PCR,examinging CT-DNA、UU-DNA、NG-DNA、HPV-DNA of the secretion of 16450 STD pationts who were infected in their urinary and reproductive tracts from the 12 municipal level hospitals in Jiangxi province.Results:The positive tates of CT、UU、NG、HPV are 16.4%、9.1%、7.1% 、6.5% from 12733 male samples and 22.0%、21.1%、10.5%、2.1% from 3717 female samples;The mixed positive rates of CT+UU are 6.3% and 0.6% of CT+NG,1.4%of CT+HPV,3.4% of UU+NG 3.7% of UU+HPV,0.7% of NG+HPV and 1.0% of the 3STDS infection The examined postitive rates are 37.1% and 48.5% in 2002 and 2003 years.Conclusion:The four STD’s pathogens range much more seriously in Jiangxi province and tend to increase years after years.

KEY WORDS  STD;CT;UU;NG;HPV;epidemiology,FQ-PCR

 

 性传播疾病（Sexually transmitted disease STD）即通过性行为传播的疾病。近些年来该疾病在我国感染情况呈增长趋势，全国经济发展较快，人口流动大以及个人卫生防护相对差是造成流行的客观条件。为了解江西省沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,  CT）、解脲支原体（Ureaplasma urealyticum , UU）、淋球菌（Neisseria gonorrhoeae , NG）和人乳头瘤病毒（Human papillomaviruses , HPV）的感染情况，笔者对江西省南北5个地级市12家医院性病门诊因生殖道感染而就诊的患者，采集其生殖道分泌物，应用荧光定量PCR检测方法，统计以上4项性病病原体数据，按照不同的性别、年龄以及不同的年份进行比较分析，报告如下。

 

2002年6月至2003年10月江西省九江市、南昌市、景德镇市、赣州市、宜春市等5个地级市12家医院性病和妇产科门诊，用无菌拭子采集的生殖道分泌物、妇女宫颈分泌物、男性尿道分泌物，置1ml灭菌生理盐水试管中，采用统一的荧光定量PCR方法检测4种性病病原体CT-DNA、UU-DNA、NG-DNA、HPV-DNA。

2.1 试剂与仪器

检测CT、UU、NG、HPV-DNA 的PCR扩增试剂由广州达安公司提供。检测仪为PE5700和大和FQD-33A型基因扩增仪。

2.2 DNA提取

将留取的分泌物标本置1ml离心管中，充分震荡摇匀，提取悬浮液转到5ml离心管中，12,000rpm离心5分钟，弃上清，再重复洗涤一次。在沉淀中加入50ul DNA提取液充分混匀，沸水浴10分钟（误差不超过1分钟），转至4^oC静置6-8小时，10,000rpm离心5分钟，取上清液5ul做PCR反应。

2.3 扩增

将点好样的反应管放入PCR仪上，93^oC2分钟预变性，然后按93^oC45秒→55^oC60秒，反应10个循环，再按93^oC30秒→55 ^oC45秒反应30个循环。每批PCR试验均做阴、阳性对照、临界阳性。

3、统计学方法

X²检验。

 

统计结果见表1（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率）

　

见表2。（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率）

性别	例数	CT+UU	CT+NG	CT+HPV	UU+NG	UU+HPV	NG+HPV	两种以上合并感染
男	1765	78(4.4%)	13(0.7%)	30(1.7%)	75(4.2%)	83(4.7%)	15(0.8%)	21(1.2%)
女	967	93(9.6%)	5(0.5%)	9(0.9%)	19(2.0%)	17(1.8%)	4(0.4%)	7(0.7%)
合计	2732	171(6.3%)	18(0.6%)	39(1.4%)	94(3.4%)	100(3.7%)	19(0.7%)	28(1.0%)

由本次调查数据统计显示，双重感染及多重感染总检出率为17.1%。

　

　

见表3。（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率）

年份	例数	CT	UU	NG	HPV	合计
2002	8104	1157(14.3%)	841(10.4%)	576(7.1%)	429(5.3%)	3003(37.1%)
2003	8346	1753(21.0%)	1096(13.1%)	715(8.6%)	482(5.7%)	4046(48.5%)
合计	16450	2910	1937	1291	911	7049

　

见表4（括号中为该种病原体在该组病例中的阳性检出率）

　

　

　

    在性传播疾病中，CT、UU、NG、HPV的感染较常见，我们所统计的12家医院均采用统一的实时FQ-PCR技术，所用仪器均为PE5700和大和FQD-33A型基因扩增仪，试剂均为中山大学达安基因诊断试剂。利用了基因扩增的灵敏性，分子杂交的特异性和光化学的精确性^[1，5]，从根本上解决了PCR扩增产物污染和不能定量的问题。同时荧光定量PCR还具有快速、操作简便、无需对PCR产物进行后处理，还具有定量范围宽、定量准确的优点^[6]。因此本次调查所统计的数据具有较高的可信性。

 江西省CT、UU、NG、HPV4种性病病原体检出率分别为17.7%，11.8%，7.8%，5.5%，总检出率为42.8%，与国内外报道并不完全一致^[7～8]，说明不同地区性传播疾病的流行存在一定的差异，另外可能与标本来源存在一定的关系。男性患者CT、UU、NG、HPV阳性检出率分别为16.4%、9.1%、7.1% 、6.5%；女性性患者CT、UU、NG、HPV阳性检出率分别为22.0%、21.1%、10.5%、2.1%；；男性CT阳性检出率（16.4%）明显低于女性（22.0%）；女性UU阳性检出率（21.1%）明显高于男性（9.1%）。NG男性阳性检出率（7.1%）低于女性阳性检出率（10.5%）；HPV男性阳性检出率（6.5%）高于女性阳性检出率（2.1%）。在此次统计调查中，各种病原体混合感染情况比较严重，有存在双重感染或多重感染，占总感染的17.1%；其中CT、UU混合感染检出率为6.3%；CT、NG混合感染检出率为0.6%；CT、HPV混合感染检出率为1.4%；UU、NG混合感染检出率为3.4%；UU、HPV混合感染检出率为3.7%；NG、HPV混合感染检出率为0.7%；两种以上混合感染的感染检出率为1.0%。因此在临床上对怀疑为STD患者应做多项性病病原学检查，以提高病原体的检出率。另外，2002、2003年阳性率存在上升趋势。在年龄段上，青少年性病感总检出率为5.7%，因此需要社会各界的关注，并做好宣传、预防、诊断和治疗工作。

　

[1] Geud C A，Williams P  M.A novel method for real time quantitative RT-PCR.Genome Res，1996，6：995-1001

[2] Heid C A， Stevens J，Livak K J， et al.Real time quantitative PCR.Genome Res，1996，6：986-994.

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[5] 林万朋．PCR技术操作和临床应用指南．北京：人民军医出版社，1995．35

[6] 卢圣栋 主编，生物技术与疾病诊断（兼论人类基因治疗）.北京：化学工业出版社，2002

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